"N1E-115:小鼠神经母细胞瘤传代细胞
细胞背景资料:神经母细胞瘤;雄性;A/J
RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
Glioma-261细胞系相关产品:BHP 10-3细胞、H2141细胞、COLO 205细胞
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
N1E-115:小鼠神经母细胞瘤传代细胞
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Hs 821.T细胞系相关产品:RH-35细胞、SK Mel 24细胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞
MLE12细胞系相关产品:KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞
M-NFS-60细胞系相关产品:ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
N1E-115:小鼠神经母细胞瘤传代细胞
细胞生长特性:贴壁
CCRFCEM细胞系相关产品:MM-1S细胞、SR786细胞、HTori:3细胞
RPMI8226/S细胞系相关产品:HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
MDA-436细胞系相关产品:RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
细胞的冻存:目前,细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×10(6)~1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
CAL 39细胞系相关产品:MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞
MM1.S细胞系相关产品:TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞
Mv1.Lu细胞系相关产品:MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞
Jeko1细胞系相关产品:Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞
NB.4细胞系相关产品:FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞
HDQP1细胞系相关产品:Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞
LICR-LON-HN6细胞系相关产品:NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
DMS-53细胞系相关产品:HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
NCI-522细胞系相关产品:SR细胞、He La细胞、TE14细胞
HFL细胞系相关产品:HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞
DMS273细胞系相关产品:CF PAC-1细胞、CC-LP-I细胞、P-815细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
T-98细胞系相关产品:SKml2细胞、MKN-28细胞、MDCK Type II细胞
TOV112D细胞系相关产品:MKN7细胞、EB1细胞、HIC细胞
Hs 281.T细胞系相关产品:COLO-320-DM细胞、NCM460细胞、ARH-77细胞
NCI-H2085细胞系相关产品:L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
NCI-H2085细胞系相关产品:L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品:TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞
hEM15A细胞系相关产品:NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞
M-O7e细胞系相关产品:HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞
DV-90细胞系相关产品:Eca-109细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞、Duck embryo细胞
Hep 3B2_1-7细胞系相关产品:SMMC 7721细胞、QGP 1细胞、HEH2细胞
NCIH650细胞系相关产品:K7M2 wt细胞、T 24细胞、MDA-361细胞
TK-1细胞系相关产品:TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞系相关产品:OVCAR-5细胞、A-101D细胞、FCCH1018细胞
FHs74 Int细胞系相关产品:HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
N1E-115:小鼠神经母细胞瘤传代细胞
Panc 3.27细胞系相关产品:J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞
IM-95细胞系相关产品:A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞
MHCC97L细胞系相关产品:MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
Simpson细胞系相关产品:RERFLCMS细胞、TE-9细胞、UMRC-2细胞
U251-MG细胞系相关产品:Leukemia L1210细胞、DMS-153细胞、CCD33Co细胞
COLO_320DM细胞系相关产品:HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞
OCI-Ly 19细胞系相关产品:SK-HEP-1细胞、UCLA RO-81-A-1细胞、J 82细胞
EB-3细胞系相关产品:SW 1783细胞、SK-NM-C细胞、Y3-Ag 1.2.3细胞
NCI-SNU-119细胞系相关产品:NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
ZR75-30细胞系相关产品:NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞
SPCA-1细胞系相关产品:Hs-688A-T细胞、BC-020细胞、CAL62细胞
McG-1细胞系相关产品:Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞
MRC9细胞系相关产品:HLEB-3细胞、NCI-H226细胞、NCIH510细胞
LIM 1215细胞系相关产品:U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞
KYSE-270细胞系相关产品:MCA 38细胞、NCI-H2108细胞、GM02132C细胞
MCF-7ADR细胞系相关产品:Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
SL-1细胞系相关产品:C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞
H920细胞系相关产品:HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
HCC0070细胞系相关产品:NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
NCI-H2108细胞系相关产品:COLO 684细胞、D6P2T细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞
Tn 5B1-4细胞系相关产品:H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞
ZR7530细胞系相关产品:Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
VA-ES-BJ细胞系相关产品:SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞
MOLM-16细胞系相关产品:McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
N-Tera-2细胞系相关产品:RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
NCIH1436细胞系相关产品:RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
Becker细胞系相关产品:WI38细胞、L cell line细胞、PCI:SG231细胞
SKHEP1细胞系相关产品:Rat 1细胞、Human Liver-7702细胞、KHYG1细胞
GM-3573细胞系相关产品:CCD18细胞、COLO-394细胞、CCRF-CEM C7细胞
IOSE29细胞系相关产品:C32r细胞、SCC7细胞、CORL26细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞系相关产品:SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品:NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
RBMEC细胞系相关产品:mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞
N1E-115:小鼠神经母细胞瘤传代细胞
LUDLU1细胞系相关产品:OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
TO175T细胞系相关产品:CMT167细胞、CLONE M3细胞、HEK-293-FT细胞
V79-1细胞系相关产品:MM96L细胞、BNL.CL2细胞、MMAc.SF细胞
Mv1.Lu细胞系相关产品:MDA-MB-361细胞、SV40-MES13细胞、CX-1细胞
PC3M-1E8细胞系相关产品:KYSE-270细胞、AMC-HN-8细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
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