"KU-19-19：人膀胱癌传代细胞
细胞背景资料：膀胱癌；男性
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞
细胞形态：上皮细胞样
细胞生长：贴壁
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
KU-19-19：人膀胱癌传代细胞
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
NCI-H-128细胞系相关产品：RPMI 8226/S细胞、NRK-49F细胞、C-127细胞
HKC细胞系相关产品：SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞
C3H10T1/2CL8细胞系相关产品：SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KU-19-19：人膀胱癌传代细胞
细胞生长特性：贴壁
alpha-TC1.6细胞系相关产品：Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞
H-1048细胞系相关产品：3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
L Wnt-3A细胞系相关产品：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
L-363细胞系相关产品：H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
CCD1095Sk细胞系相关产品：NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞
KY-50细胞系相关产品：CL MC/9细胞、NCI-SNU-407细胞、Hs 606细胞
RCC10 RGB细胞系相关产品：HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
CEMO-1细胞系相关产品：HCC-1395细胞、MADB 106细胞、NUGC-3细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
B16/BL6细胞系相关产品：ketr 3细胞、Huh-7.5细胞、RWPE2细胞
SVG(P12)细胞系相关产品：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
HS0578T细胞系相关产品：L cells (TK-)细胞、TK 10细胞、MGc80-3细胞
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞
Tu 212细胞系相关产品：H-187细胞、769P细胞、ssMCF7细胞
SCC-1395细胞系相关产品：mREC细胞、HCC-1500细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
GOTO细胞系相关产品：MTC-TT细胞、OV 1063细胞、KRC-Y细胞
FLC-7细胞系相关产品：B16 F10细胞、B95-8细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞
Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
H1930细胞系相关产品：NB.4细胞、HPBALL细胞、HuTu 80细胞
H-1755细胞系相关产品：NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
CAL33细胞系相关产品：RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞
Mouse Forestomach Carcinoma细胞系相关产品：MCA 205细胞、GM00346B细胞、Capan-1细胞
U2-OS细胞系相关产品：bEnd3细胞、SK-RC-52细胞、OAW-42细胞
293 F细胞系相关产品：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞
Hs832T细胞系相关产品：PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
HN-6细胞系相关产品：ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
SKNMC细胞系相关产品：KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞
A 549细胞系相关产品：HLEC-SRA 01/04细胞、MMAc-SF细胞、MSB1细胞
KU-19-19：人膀胱癌传代细胞
UMRC-2细胞系相关产品：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
Rat podocyte细胞系相关产品：WM 239-A细胞、HCC2185细胞、CHL-1细胞
HCV 29细胞系相关产品：Ly19细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、OSRC2细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品：Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品：BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：SMMC7721细胞、NCI-HUT-460细胞、LSC-1细胞
NCIH1417细胞系相关产品：SUP-T1细胞、E.L.4细胞、Panc 2.03细胞
B-16细胞系相关产品：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
Mouse Bladder Tumor line-2细胞系相关产品：NPA87-1细胞、Porcine Kidney-15细胞、IPLB-SF-21细胞
GES-1细胞系相关产品：HCET细胞、PC-14细胞、GI-1细胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞系相关产品：U251细胞、SNU1040细胞、MLFC细胞
SU86-86细胞系相关产品：H-4细胞、S3 HeLa细胞、UPCI:SCC090细胞
MALME 3M细胞系相关产品：A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞
BCECs细胞系相关产品：PANC403细胞、MCF-7/ADR-RES细胞、MDA-MB 468细胞
SKCol1细胞系相关产品：AtT 20细胞、NCIH250细胞、OVCAR-8/ADR细胞
SKLMS-1细胞系相关产品：NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞
CCD-19Lu细胞系相关产品：HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞
AE1201细胞系相关产品：COLO 357细胞、WM-266-mel细胞、MM1S细胞
MUS-M1细胞系相关产品：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
COLO 824细胞系相关产品：KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
NCI-446细胞系相关产品：RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞
SV-HUC-1细胞系相关产品：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞
HSC-2细胞系相关产品：Hs-578-T细胞、EPC细胞、MPC-11细胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞系相关产品：Fortner's melanotic melanoma #3细胞、3T3-442A细胞、HCCC9810细胞
SVGp12细胞系相关产品：H-2066细胞、SW-1573细胞、TE354T细胞
B16-F10--RED细胞系相关产品：3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞
OAW 42细胞系相关产品：RMG-I细胞、ME-180细胞、RPMI no 8226细胞
GM03190A细胞系相关产品：A-253细胞、Fu97细胞、TEC细胞
TGW-I-nu细胞系相关产品：NOK细胞、N1E-115细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞
HLCL9B10细胞系相关产品：HCC1599细胞、8402细胞、BSC40细胞
RetroPack PT67细胞系相关产品：MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
MCF.7细胞系相关产品：SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
T/GHA-VSMC细胞系相关产品：SGC-7901细胞、NCIH441细胞、KOSC2细胞
KU-19-19：人膀胱癌传代细胞
OCI AML5细胞系相关产品：H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品：2V6.11细胞、MX-1细胞、A2780/CP细胞
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、H-2291细胞、COLO 738细胞
KY-270细胞系相关产品：B78细胞、KE37细胞、SC1细胞
CNE1-LUC细胞系相关产品：Neuro2a细胞、L-Wnt3A细胞、J 774A.1细胞
"
