pIL-6-promoter-luc (报告基因质粒)
pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)是信裕生物自行研发的用于检测IL-6 promoter转录活性水平的报告基因质粒。
pIL-6-promoter-luc是以信裕生物的pGL6质粒为模板，在其多克隆位点插入了human IL-6的启动子序列(-637bp～+53bp)，可以高灵敏度地检测IL-6 promoter的激活水平。
IL-6(Interleukin-6)，中文名为白细胞介素-6，简称白介素6，是一种非常重要的炎性细胞因子，在炎性疾病的发生发展过程中起重要作用，常作为炎症反应的重要指标。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比
Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pIL-6-promoter-luc质粒的主要信息如下：
luc2 reporter gene
753-2405
SV40 late poly(A) signal
2440-2661
SV40 early enhancer/promoter
2709-3127
Synthetic neomycin phosphotransferase (Neor) coding region
3152-3946
Synthetic poly(A) signal
3971-4019
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
4086-4105
ColE1-derived plasmid replication origin
4343
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
5134-5994
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
6099-6252
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
6201-6220
pIL-6-promoter-luc质粒的图谱如下：
pIL-6-promoter-luc的多克隆位点及IL-6 promoter的详细图谱如下：
1
GGCCTAACTG
GGAGACGCCT
TGAAGTAACT
GCACGAAATT
CCGGATTGAC
CCTCTGCGGA
ACTTCATTGA
CGTGCTTTAA
51
TGAGGGTGGC
CAGGCAGTTC
TACAACAGCC
GCTCACAGGG
AGAGCCAGAA
ACTCCCACCG
GTCCGTCAAG
ATGTTGTCGG
CGAGTGTCCC
TCTCGGTCTT
101
CACAGAAGAA
CTCAGATGAC
TGGTAGTATT
ACCTTCTTCA
TAATCCCAGG
GTGTCTTCTT
GAGTCTACTG
ACCATCATAA
TGGAAGAAGT
ATTAGGGTCC
151
CTTGGGGGGC
TGCGATGGAG
TCAGAGGAAA
CTCAGTTCAG
AACATCTTTG
GAACCCCCCG
ACGCTACCTC
AGTCTCCTTT
GAGTCAAGTC
TTGTAGAAAC
201
GTTTTTACAA
ATACAAATTA
ACTGGAACGC
TAAATTCTAG
CCTGTTAATC
CAAAAATGTT
TATGTTTAAT
TGACCTTGCG
ATTTAAGATC
GGACAATTAG
251
TGGTCACTGA
AAAAAAAAAT
TTTTTTTTTT
CAAAAACCAT
AGCTTTAGCT
ACCAGTGACT
TTTTTTTTTA
AAAAAAAAAA
GTTTTTGGTA
TCGAAATCGA
301
TATTTTTTTT
CTCTTTGTAA
AACTTCGTGC
ATGACTTCAG
CTTTACTCTT
ATAAAAAAAA
GAGAAACATT
TTGAAGCACG
TACTGAAGTC
GAAATGAGAA
351
TGTCAAGACA
TGCCAAAGTG
CTGAGTCACT
AATAAAAGAA
AAAAAGAAAG
ACAGTTCTGT
ACGGTTTCAC
GACTCAGTGA
TTATTTTCTT
TTTTTCTTTC
401
TAAAGGAAGA
GTGGTTCTGC
TTCTTAGCGC
TAGCCTCAAT
GACGACCTAA
ATTTCCTTCT
CACCAAGACG
AAGAATCGCG
ATCGGAGTTA
CTGCTGGATT
451
GCTGCACTTT
TCCCCCTAGT
TGTGTCTTGC
GATGCTAAAG
GACGTCACAT
CGACGTGAAA
AGGGGGATCA
ACACAGAACG
CTACGATTTC
CTGCAGTGTA
501
TGCACAATCT
TAATAAGGTT
TCCAATCAGC
CCCACCCGCT
CTGGCCCCAC
ACGTGTTAGA
ATTATTCCAA
AGGTTAGTCG
GGGTGGGCGA
GACCGGGGTG
551
CCTCACCCTC
CAACAAAGAT
TTATCAAATG
TGGGATTTTC
CCATGAGTCT
GGAGTGGGAG
GTTGTTTCTA
AATAGTTTAC
ACCCTAAAAG
GGTACTCAGA
601
CAATATTAGA
GTCTCAACCC
GATGTCTGAG
GTTATAATCT
CAGAGTTGGG
GGTTATTTAT
ATCCTGACCT
CTACAGACTC
651
CCCTCGAGCC
CACCGGGAAC
GAAAGAGAAG
CTCTATCTCC
CGAGTAAGAC
GGGAGCTCGG
GTGGCCCTTG
CTTTCTCTTC
GAGATAGAGG
701
TCTGCAGAAG
CTTGGCAATC
CGGTACTGTT
GGTAAAGCCA
AGACGTCTTC
GAACCGTTAG
GCCATGACAA
CCATTTCGGT
pIL-6-promoter-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pIL-6-promoter-luc)包括：
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Spl I
Srf I
Tth111 I
Vsp I
Xcm I
Xma I
Xmn I
pIL-6-promoter-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pIL-6-promoter-luc once)包括：
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
BsiC I
TT`CG,AA
4022
Bgl I
GCCN,NNN`NGGC
9
BstB I
TT`CG,AA
4022
Acc65 I
G`GTAC,C
15
Sal I
G`TCGA,C
4036
Asp718
G`GTAC,C
15
Afl III
A`CRYG,T
4286
Kpn I
G,GTAC`C
19
ApaL I
G`TGCA,C
4600
Nhe I
G`CTAG,C
430
HgiE II
ACCNNNNNNGGT
-1/134865
Aat II
G,ACGT`C
496
Not I
ACCNNNNNNGGT
5106
PaeR7 I
C`TCGA,G
664
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
5130
Xho I
C`TCGA,G
664
BstE II
G`GTNAC,C
5133
Bgl II
A`GATC,T
709
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
5208
Hind III
A`AGCT,T
719
Bsu36 I
CC`TNA,GG
5564
BsrG I
T`GTAC,A
1244
Pvu I
CG,AT`CG
5578
Dra III
CAC,NNN`GTG
1900
Sac II
CC,GC`GG
5602
Mun I
C`AATT,G
2580
Bst1107 I
GTA|TAC
5718
BamH I
G`GATC,C
2673
Xca I
GTA|TAC
5718
Stu I
AGG|CCT
3106
Spe I
A`CTAG,T
6037
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3627
pIL-6-promoter-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
RVprimer3(6201-6220):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pIL-6-promoter-luc的全序列信息： D2386 pIL-6-promoter-luc-seq.txt
包装清单：
KL-2386-1μg
pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)
1μg
KL-2386-100μg
pIL-6-promoter-luc(报告基因质粒)
100μg
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pIL-6-promoter-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用信裕生物的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. LPS等常见的可以激活IL-6 promoter的试剂，可以用作pIL-6-promoter-luc报告基因检测时的阳性对照。
