pCMV-C-HA
pCMV-C-HA是信裕生物自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端与HA tag(HA标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码HA标签的序列,因此可以表达出含有HA标签的融合蛋白,可以方便地使用抗HA的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-HA质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
Position
T3 promoter and T3 primer binding site
620-639
multiple cloning site
680-740
T7 promoter and T7 primer binding site
820-841
SV40 polyA signal
853-1236
f1 origin of ss-DNA replication
1374-1678
neomycin/kanamycin resistance ORF
2220-3011
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
3012-3470
pCMV-C-HA质粒的图谱如下:

pCMV-C-HA的多克隆位点的详细图谱如下:
651
GAGCTCCACC
GCGGTGGCGG
CCGCTCTAGC
CCGGGCGGAT
CCAAGCTTCT
CTCGAGGTGG
CGCCACCGCC
GGCGAGATCG
GGCCCGCCTA
GGTTCGAAGA
EcoRIEcoRVSalI BglII XhoI XbaI
701
GCAGGAATTC
GATATCGTCG
ACAGATCTCT
CGAGTCTAGA
CGTCCTTAAG
CTATAGCAGC
TGTCTAGAGA
GCTCAGATCT
751
ATGTTCCAGA
GGGCCCGGTA
CCTTAATTAA
TTAAGGTACC
TACAAGGTCT
CCCGGGCCAT
GGAATTAATT
AATTCCATGG
pCMV-C-HA中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-HA)包括:
Age I
Ahd I
Asc I
Bbs I
Bbv II
Blp I
Bsg I
BsiW I
BsmB I
BspM II
BsrG I
BssH II
Bst1107 I
BstE II
Ear I
Eco47 III
Eco72 I
EcoN I
Esp I
Fse I
Nru I
PflM I
Pme I
Pml I
PpuM I
Psp1406 I
Sap I
Sca I
pCMV-C-HA中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-HA once)包括:
Nde I
CA`TA,TG
241
Pvu I
CG,AT`CG
854
SnaB I
TAC|GTA
347
Bcl I
T`GATC,A
1008
Nhe I
G`CTAG,C
598
Mun I
C`AATT,G
1101
Sac I
G,AGCT`C
656
Hpa I
GTT|AAC
1114
Sac II
CC,GC`GG
663
Mlu I
A`CGCG,T
1237
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
664
Dra III
CAC,NNN`GTG
1467
Not I
GC`GGCC,GC
669
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
2124
PspA I
C`CCGG,G
681
BseR I
GAGGAG 16/14
2167
Xma I
C`CCGG,G
681
Stu I
AGG|CCT
2170
Srf I
GCCC|GGGC
683
Cla I
AT`CG,AT
2189
Sma I
CCC|GGG
683
Kas I
G`GCGC,C
2348
BamH I
G`GATC,C
688
Nar I
GG`CG,CC
2349
Hind III
A`AGCT,T
694
Ehe I
GGC|GCC
2350
Pst I
C,TGCA`G
704
Bbe I
G,GCGC`C
2352
EcoR I
G`AATT,C
706
Msc I
TGG|CCA
2431
EcoR V
GAT|ATC
714
Tth111 I
GACN`N,NGTC
2467
Sal I
G`TCGA,C
718
BsrD I
GCAATG, 8
2582
Acc I
GT`MK,AC
719
Bsp1286 I
G,DGCH`C
2652
Bgl II
A`GATC,T
724
Rsr II
CG`GWC,CG
2865
PaeR7 I
C`TCGA,G
730
BsiC I
TT`CG,AA
3031
Xho I
C`TCGA,G
730
BstB I
TT`CG,AA
3031
Xba I
T`CTAG,A
736
Bsa I
GGTCTC 7/11
3338
Afl II
C`TTAA,G
767
HgiE II
ACCNNNNNNGGT-1/13
3678
Bsp120 I
G`GGCC,C
772
ApaL I
G`TGCA,C
3953
pCMV-C-HA质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(820-841): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-C-HA的全序列信息: D2639 pCMV-C-HA-seq.txt
包装清单:
KL-2639-1μg
pCMV-C-HA
1μg
KL-2639-100μg
pCMV-C-HA
100μg
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。