pAP1-TA-luc (报告基因质粒)
pAP1-TA-luc (报告基因质粒)是信裕生物自行研发的用于检测AP1转录活性水平的报告基因质粒。pAP1-TA-luc是以信裕生物的pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个AP1结合位点,可以高灵敏度地检测AP1的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pAP1-TA-luc质粒的主要信息如下:
AP1 response element
26-67
Minimal TA promoter (pTA)
90-112
luc2 reporter gene
154-1806
SV40 late poly(A) signal
1841-2062
SV40 early enhancer/promoter
2110-2528
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region
2553-3347
Synthetic poly(A) signal
3372-3420
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region
3487-3506
ColE1-derived plasmid replication origin
3744
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region
4535-5395
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site
5500-5653
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region
5602-5621
pAP1-TA-luc质粒的图谱如下:
pAP1-TA-luc的多克隆位点及AP1 response element的详细图谱如下:
BglI KpnI NheI AP1 response elememt
1
GGCCTAACTG
GCCGGTACCG
AATGACTAAT
CCGGATTGAC
CGGCCATGGC
TTACTGATTA
BglII HindIII Minimal TA promoter
pAP1-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pAP1-TA-luc)包括:
Aat II
Afl II
Asc I
Ase I
Bsa I
BsaA I
BsiW I
BspM II
BssH II
Eco72 I
EcoR I
EcoR V
Mlu I
Nde I
Nru I
PaeR7 I
PflM I
Pme I
Pml I
Psp1406 I
PspA I
Rsr II
Sac I
Sma I
SnaB I
Spl I
Srf I
Tth111 I
Vsp I
Xcm I
Xho I
Xma I
pAP1-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pAP1-TA-luc once)包括:
Sfi I
GGCCN,NNN`NGGCC
9
BstB I
TT`CG,AA
3423
Bgl
IGCCN,NNN`NGGC
9
Sal I
G`TCGA,C
3437
Acc65 I
G`GTAC,C
15
Afl III
A`CRYG,T
3687
Asp718
G`GTAC,C
15
ApaL I
G`TGCA,C
4001
Kpn I
G,GTAC`C
19
HgiE II
ACCNNNNNNGGT -1/13
4266
Nhe I
G`CTAG,C
21
Not I
GC`GGCC,GC
4507
Bgl II
A`GATC,T
69
BstX I
CCAN,NNNN`NTGG
4531
Hind III
A`AGCT,T
79
BstE II
G`GTNAC,C
4534
BsrG I
T`GTAC,A
645
Ahd I
GACNN,N`NNGTC
4609
Dra III
CAC,NNN`GTG
1301
Bsu36 I
CC`TNA,GG
4965
Gsu I
CTGGAG 21/19
1534
Pvu I
CG,AT`CG
4979
Bpm I
CTGGAG 22/20
1535
Sac II
CC,GC`GG
5003
Apo I
R`AATT,Y
1917
Bst1107 I
GTA|TAC
5119
Mun I
C`AATT,G
1981
Xca I
GTA|TAC
5119
BamH I
G`GATC,C
2074
Spe I
A`CTAG,T
5438
Stu I
AGG|CCT
2507
BsmA I
GTCTC`/9
5450
EcoN I
CCTNN`N,NNAGG
3028
BsmB I
CGTCTC 7/11
5451
pAP1-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
RVprimer3 (5602-5621):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pAP1-TA-luc的全序列信息:d2109-pAP1-TA-luc-seq.txt
包装清单:
KL-2109-1μg
pAP1-TA-luc (报告基因质粒)
1μg
KL-2109-100μg
pAP1-TA-luc (报告基因质粒)
100μg
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。