Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)

Annealing Buffer for RNA Oligos (5X)

信裕生物生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，即RNA寡核苷酸退火缓冲液，是一种经过我们多次实验证实、可以用于RNA oligo退火的缓冲液。用于siRNA而合成的互补的RNA oligo可以用该退火缓冲液进行退火，以形成双链RNA。使用信裕生物生产的Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，可以有效避免RNA oligo自身形成发夹结构，有利于退火的正确进行。
使用本试剂盒操作非常简单，只需把待退火的RNA oligo和Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)按照一定比例混合后，置于PCR仪上，约60分钟即可完成。
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)经过特殊处理，不含RNase，可避免RNA的降解。
如果一次退火反应体积为100微升，一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
包装清单：

保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)只适合于RNA oligo的退火，不适合用于DNA oligo 的退火。
由于RNA非常容易被降解，一定要严格遵守RNA的操作规范，防止RNase污染。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

使用说明：
1. 把待退火的RNA oligo用DEPC水配制成200μM。溶解Annealing Buffer for RNA Oligos(5X)，混匀备用。 
2. 如下设置退火反应体系：

按照上述顺序依次加入各种试剂，混匀。如果用的PCR仪没有热盖，在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
3. 如下设置PCR仪进行退火反应：

注1：每5秒下降0.1℃，降至25℃的程序设置，以Bio-Rad的T100为例为：1. 90℃, 2:00; 2. 90º, 0.05, -0.1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 650X; 4. 4℃, ∞。
注2：如果所用的PCR仪不具备下降0.1℃的功能，也可以设置为每60秒下降1℃。程序设置以Bio-Rad的T100为例为：1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65X; 4. 4℃, ∞。
注3：如果条件有限，也可以将水浴锅加热至90℃，把PCR管放在水浴锅中，或者把煮沸的热水加入到保温杯或保温瓶中，待水温降到90℃时放入PCR管。所用水量控制在1-2小时内自然降温至25℃左右。此方法的退火效果可能会比使用PCR仪略差一些。
4. 退火结束后可以直接用于转染细胞，也可以-20℃冻存备用。