RNALater™动物组织RNA稳定保存液
信裕生物的RNALater™动物组织RNA稳定保存液(RNALater™ RNA Stabilization Reagent for Animal Tissue),简称RNALater™试剂或RNALater™,是一种用于采集动物组织时,仅需室温操作,即可迅速抑制RNase并稳定保存组织样品中RNA的无毒无害液态试剂。本产品广泛用于新鲜动物组织样品或细胞样品中RNA的稳定与保存。
本产品使用范围广。本产品能够用于各种动物组织样品中RNA的稳定和保存,如肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、心脏、肌肉、骨组织等,也可用于培养细胞、真菌、细菌、血液以及某些植物样品的保存。
本产品的效果和液氮冻存的效果一致。本产品可以迅速渗透到组织内部,完全抑制RNase,避免RNA降解,保持组织RNA的完整性,从而完美保存组织中的基因表达谱,并且和液氮一样可以长期保存样品中的RNA。
本产品安全便捷。本产品无任何毒性和刺激性,可室温使用,确保了使用时的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低温的液氮而引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患,并且携带、运输非常方便。
本产品适用于普通新鲜组织或细胞样品中RNA的稳定和保存,更加适合样品收集后不能够立即进行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情况,特别适用于野外或临床采集的样品、大批量采集的动物组织样品和不能立即冻存样品的RNA稳定与保存。
在本产品中样品的保存时间和存储温度相关,例如37℃可保存1-2天,室温可保存一周,4℃可以保存1个月,-20℃或更低温度可以长期保存。具体如下表所示:
存储温度
37℃
25℃
4℃
-20℃
-80℃
使用本产品在-20℃或-80℃冻存的样品,反复冻融3-5次不会显著影响RNA的质量。通常情况下,推荐把本产品保存的样品在室温或4℃运输或短期存放,-20℃或-80℃长期存放。如果希望-20℃或-80℃长期存放,必须先4℃存放过夜或更长时间后,才能转移到更低温度存放。
本产品对于小鼠组织和HeLa细胞样品的保存效果如图1所示。组织和细胞用RNALater™分别在4℃保存1个月、室温保存1周以及37℃保存1天后,抽提获得的RNA与新鲜样品一样均能够保持完整性;而用PBS在37℃保存1天后,大部分RNA都已经被降解。
图1. RNALater™对于小鼠组织和HeLa细胞中RNA的稳定保存效果。按照图中相应条件保存后,利用信裕生物的RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)(R0024/R0026/R0027)抽提RNA,随后取相同体积的RNA样品变性处理后,在含6.67%甲醛和适量NA-Red的1.2%变性琼脂糖凝胶中进行电泳检测。
本产品保存的组织样品能用常规的RNA抽提方法进行RNA抽提,如Trizol法和离心柱法等,特别适用于信裕生物的RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)(R0024/R0026/R0027)。使用时直接将样品从RNALater™中取出当作普通的新鲜或冻存的样品即可,少量残留的RNALater™试剂不会影响后续抽提效果。
本产品也可用于组织中蛋白和DNA的稳定和保存,但RNALater™会导致蛋白变性,后续可进行Western Blot、SDS-PAGE等实验,而不适用于检测酶活力等须保持蛋白活性的实验。如需保持蛋白酶活力,可以选用信裕生物的AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液(R0121)。样品从RNALater™中取出后可直接当作新鲜或冻存的样品按照常规方法进行蛋白提取。
一个包装的本产品可以用于约100-200个重量为100mg样品的保存。
包装清单:
XY-0118
RNALater™动物组织RNA稳定保存液
100ml
保存条件:
室温或4℃保存,2年有效。
注意事项:
实验中获得的组织样品适当处理大小后,应迅速并完全浸泡在RNALater™试剂中。
本产品适用于新鲜动物组织样品或细胞中RNA的稳定与保存。样品冻存后再用RNALater™保存的效果会比直接将新鲜样品用RNALater™保存差很多。本产品尽管对于冻存的样品也有一定的稳定保存作用,但更适合新鲜样品。
用本产品保存后,样品可能会变得微硬,为正常现象,不会影响后续RNA抽提时组织的匀浆、裂解等操作。
样品如果需要-20℃或-80℃长期保存,应4℃保存过夜或更长时间后才能再转移至-20℃或-80℃保存,以保证RNALater™试剂更加充分有效地完全浸入组织内部。
-20℃或-80℃保存情况下,样品解冻时RNALater™试剂中可能有结晶析出,属正常现象,可待结晶完全溶解后使用,不会影响后续RNA的抽提效果。
血液白细胞样品按照常规方法分离后,可以参考细胞样品的方法进行保存。
用于植物样品保存时,应当去除表面蜡质,确保RNALater™试剂能充分进入组织内部。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 对于组织样品:
a. 保存:将组织剪切成长宽高均不大于0.5厘米的组织块,迅速完全浸泡于5-10倍体积RNALater™试剂中(例如100mg组织需约0.5-1ml RNALater™试剂),此时室温可以保存一周,4℃可以保存一个月,4℃至少保存过夜后可以在-20℃或-80℃保存3-5年。组织块过大时,RNALater™试剂会出现不易充分渗透到组织中心处的问题,导致未充分渗透处RNA出现一定程度的降解。
b. RNA抽提时样品的处理:用洁净的镊子将组织块从RNALater™试剂中取出,纸巾吸除表面残液,迅速置于适当裂解液中进行匀浆或液氮中进行研磨操作。后续即可采用离心柱法或Trizol等进行RNA抽提操作。
2. 对于细胞等样品:
a. 保存:收集的新鲜细胞样品用PBS洗涤后,5000g离心1-2分钟,吸除PBS后小心加入5-10倍体积RNALater™试剂,避免将细胞冲起,然后置于相应温度条件下保存备用。
注意:尽量保持细胞样品处于紧实状态,避免细胞重悬,否则可能会对后续RNA得率有一些影响。对白细胞、细菌、真菌样品进行保存时,请参考细胞的方法进行。
b. RNA抽提时样品的处理:加入与RNALater™试剂等体积的PBS或DEPC水,10,000g离心1分钟收集细胞样品,小心吸除上清液,后续即可采用离心柱法或Trizol进行RNA抽提操作。当保存样品的RNALater™试剂的体积小于100μl时,可以直接加入RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)(R0024/R0026/R0027)中的裂解液300μl,当RNALater™试剂的体积在100-200μl之间时可以直接加入600μl裂解液,随后按照试剂盒的操作步骤提取总RNA。