增强型DAB显色试剂盒

增强型DAB显色试剂盒

产品及特点增强型 DAB 显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶（HRP）的所有试剂，适合于检测各种印迹膜上标记的 HRP。其反应原理是 HRP 可以催化底物 DAB 在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物，可根据颜色的有无和深浅来检测 HRP 的存在与否或存在量，进而推测 HPR 标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下：

本产品具有下列特点：

1. 即开即用，不需要用户准备任何材料。

2. DAB 以干粉提供，方便运输。

3. 可用于各种印迹膜（包括 Southern、Northern、Western 印迹膜）和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用 Nuclear fast red 复染。

4. 跟 PVDF 膜、尼龙膜兼容。

5. 显色过程中需要避光，在显色后可拍照或扫描。
规格及成分 成 份 编 号十孔盒包装
DAB 干粉 LM81223a 100 mg（棕色管）
10 mL 塑料瓶 81223b 1 个
20×DAB 溶解液 81223c 5 mL
增强剂 81223d 1 mL（棕色管）
H2O2 81223e 1 mL（白盖）
使用手册 81223sc 1 份
注意：本产品可以配制 100mL 增强型 DAB 显色液，但其具体使用次数根据跟印迹膜 的大小密切相关

运输及保存 常温运输，4℃保存，有效期 1 年。

自备试剂 超纯水、HRP 标记物（抗体或探针）处理过的印迹膜 

使用方法 注意：DAB 有毒性，处理时需要戴手套。

1. 在 10mL 塑料瓶（本试剂盒提供）中加入自备去离子水 4.75mL，加入 20× DAB 溶解液 0.25 mL，摇匀，将 100 mg DAB 干粉全部加入，充分振荡混匀， 所得溶液即是 20×DAB 浓缩液。此溶液如果一次不能用完，可以分装成小管 在-20℃避光放置 6 个月。

2. 按每 cm2印迹膜需要 0.1mL DAB 显色液的比例计算所需显色液的量，并按下 表配制 DAB 显色液（此处以配制 10 mL 为例，用户如需要配制其他体积，可按比例增减各成分用量）： 成份 用量 20×DAB 溶解液 0.5 mL 自备去离子水 9 mL 20×DAB 浓缩液 0.5 mL 增强剂 0.1 mL H2O2 10 uL

3. 如果是印迹膜，则迅速将印迹膜转移到上步得到的 DAB 显色液中，室温避光 静置。待印迹膜上出现满意的条带时（一般需要 2-3 分钟，最长不超过 10 分 钟，具体跟靶分子浓度密切相关），迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇 晃，终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水 分，照相处理后避光干燥保存印迹膜。

4. 如果是组织切片，则直接将 DAB 染色液滴加在切片上，室温避光放置 10 分钟， 然后浸在超纯水中数次，空气中干燥后显微镜下检测或照相。