大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞

大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞

产品及特点BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于 BL21(DE3)菌株，由特殊工艺制作，使用 pUC19质粒检测本产品，转化效率可达 107cfu/μg。BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有 rne131 基因突变体。rne131 突变基因能够增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性，从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于 T7 启动子表达载体(如 pET 系列)的高水平蛋白表达。菌株基因型为：F- ompT hsdSB(rB-mB) gal dcm rne131(DE3)
规格及成分 成分 编号 包装
本产品 90507 0.1 mL×10
使用手册 1 份

运输及保存 干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂 目的 DNA、LB 培养基等

使用方法

 1. 从-80℃冰箱中取出感受态细胞，置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。

2. 取 100μL 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。

3. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。

4. 向离心管中加入 700μL 不含抗生素的无菌培养基(LB)，混匀后 37℃，200rpm 复苏60 分钟。

5. 取 100μL 左右菌液涂布于含相应抗生素的 LB 培养基上。如果转化高浓度的质粒，可以减少涂布的量。

6. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。