通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)

通用型全基因组扩增试剂盒(WGA)

产品及特点 本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点：

1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。

2. 可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。

3. 可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。

4. 操作简便快捷，恒温（30℃）反应，无须PCR仪即可实现扩增。

5. 产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析（片段差异，微卫星差异，SNP，STR）等。

6. 本产品只能用于科研。
规格及成分 成 份 编 号 十孔盒包装
WGA 溶液 A 100941a 250 μL（白盖）
2×WGA 溶液 B 100941b 300 μL（蓝盖）
phi 29 DNA 聚合酶（10U/μL） 100941c 25 μL（红盖）
使用手册 100941sc 1 份

自备试剂 超纯水（无 DNA 和 DNase 污染）

运输及保存 低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法本产品适用于纯化好的基因组DNA。

一、模板变性

1. 在PCR塑料管中加入9μL WGA溶液A，加入1μL纯化好的基因组DNA模板（DNA含量好在10ng-100ng之间）。

2. 在PCR仪器上95℃3分钟变性模板DNA。注意：必须打开热盖。

3. 冰上放置待用。

4. 加入10 μL 2×WGA溶液B，轻柔吹打混匀。

5. 加入1 μL phi 29 DNA聚合酶（10U/μL），轻柔吹打混合均匀。

6. 30℃保温10-12小时。好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，好在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。

7. 65℃保温20分钟使phi29 DNA聚合酶彻底灭活，然后-20℃长期放置或立即

使用。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以强烈推荐反应结束后65℃保温20分钟以将酶彻底灭活以免其干扰后续反应或长期保存时其降解DNA。