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填入法DNA探针末端标记试剂盒

Fill-in DNA End Labeling Kit
1190 5次 起订
上海 更新日期:2024-03-28

上海泽叶生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
填入法DNA探针末端标记试剂盒
英文名称:
Fill-in DNA End Labeling Kit
保存条件:
常温运输和保存
纯度规格:
99.99%
产品类别:
分子生物学 探针标记及检测

填入法DNA探针末端标记试剂盒

 

原理及特点本产品是基于 DNA 聚合酶能够在 DNA 粘性末端的 3’凹端掺入 dNTP的原理而设计,该反应的示意图如下:本产品是在上述原理的基础上开发的,具有下列特点:

1. 快速,15 分钟即可完成标记反应。

2. 可用于任何 3’凹端的 DNA 片段。

3. 可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高辛标记的核苷酸等)。

4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高辛标记核苷酸三种选择。

5. 同时提供非标记的 dNTP,用户可以根据粘性末端序列使用。

6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、NorthernBlot(不推荐用于低丰度 RNA 检测)、小 RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

7. 本产品足够 5 次 20uL 体系的标记反应。

8. 本产品仅供科研使用。

规格及成分 成 份 编 号 十孔盒包装

Klenow DNA 聚合酶 131235a 10 uL(红盖)

10×Klenow DNA 聚合酶缓冲液 131235b 10 uL(白盖)

dATP 溶液,2.5mM 130912 10 uL(黄盖)

dTTP 溶液,2.5mM 130913 10 uL(绿盖)

dGTP 溶液,2.5mM 130914 10 uL(蓝盖)

dCTP 溶液,2.5mM 130915 10 uL(紫盖)

Biotin-11-dUTP 溶液 120653b 10uL(本色盖仅 B 型)

DIG-11-dUTP 溶液 120653c 10uL(本色盖仅 C 型)

超纯水 100935 1 mL(蓝盖)

使用手册 120653sc 1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年

自备试剂 DNA 模板

使用方法 1. 在 0.2 mL 微量离心管中按下表设置一个 20uL 体系的标记反应(如果需

要标记更多探针,请增加标记体积而不要增加探针 DNA 的浓度):

成份 用量

待标记 DNA(3’凹陷) 100-200 pmol

Klenow DNA 聚合酶缓冲液,10× 2 uL

自备标记核苷酸(A 型)

Biotin-11-dUTP 溶液(B 型)

DIG-11-dUTP 溶液(C 型)

1 uL

与标记核苷酸不相同的三种非标记

核苷酸,2.5mM(对 B 型和 C 型,标

记的是 dUTP,相当于 dTTP,因此

应该加 dATP、dCTP 和 dGTP)

各 1uL,共 3uL

Klenow DNA 聚合酶 1 uL

超纯水 补到 20 uL

2. 37℃反应 30 分钟。

3. 70℃ 10 分钟灭活 Klenow DNA 聚合酶。

4. 如果需要,可以用斑点杂交法检测标记效率(本产品不含相关试剂)。

5. 如果是非同位素标记,探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非

同位素标记的探针,请不要酚/氯仿抽提,因为非同位素标记物一般会使

探针 DNA 进入有机相而丢失。

6. 使用时需将探针以 1-8 ng/uL 的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链 DNA,加入前还需热变性)。如果不立即使用,非同位素标记的探针DNA 可-20℃长期放置一年,同位素标记的探针 DNA 不能放置。

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公司简介

上海泽叶生物科技有限公司是一家服务于生命科学领域的高新技术企业,主要为科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学、材料科学,通用试剂、药物合成试剂、手性化合物、催化剂及配体、分析试剂、生物试剂,检测试剂等等

成立日期 (8年)
注册资本 100万元整
员工人数 1-10人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 贸易,试剂,定制,服务
主营行业 生物化工,有机原料,化学试剂,医药原料,技术服务

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