线状DNA清除剂

线状DNA清除剂

产品及特点 

分离纯化环状DNA（质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA和某些病毒DNA）的时候经常需要去除其中的基因组DNA污染，否则会对后续的PCR、WGA和测序等反应产生干扰。而基因组DNA一般都十分巨大，无论是线状（如真核细菌基因组DNA）还是环状(如细菌DNA)，经过常规的DNA纯化过程都会变成20-50 Kb大小的线状DNA，而上述环状DNA一般还能保持环状构型。根据这一特点，本公司开发了专门用于去除线状DNA的本产品，它有如下优点：

1. 即开即用，不需用户花费大量时间去摸索各种条件。

2. 酶法去除线性DNA，专一性强，可以使线状DNA污染降级几个数量级，不会干扰后续试验。

3. 不降解有nick和gap的环状DNA，包括质粒DNA、线粒体DNA、叶绿体DNA、环状病毒DNA。

4. 处理不依赖于DNA序列，可降解任何线状DNA。而内切酶去除线状DNA则需要预先确知其在环状DNA上没有酶切位点。

5. 得到的环状DNA可用于多种后续试验，尤其是WGA、PCR和测序等对污染敏感的试验。
规格及成分 成 份 编 号 十孔盒包装 
线状 DNA 清除剂溶液 A 101101a 100 uL 线状 DNA 清除剂溶液 B 101101b 30 uL 微量核酸沉淀剂 50903 2 mL 使用手册 101101sc 1 份

自备试剂 超纯水、75%乙醇

运输及保存 低温运输、-20℃保存, 有效期一年。

使用方法 

1. 在干净塑料离心管中，按下表加入各成分（30 uL体系）：

2. 加200 uL石蜡油后，37℃保温16小时。如果使用热盖打开的PCR仪则可以不加石蜡油。注意：保温时间过短可能会形成短的DNA片段，影响后续反应，所以保温16小时。由于保温时间太长，不加石蜡油或不开热盖则反应体系中的水分在16小时的保温期间会蒸发到管盖上，严重影响反应的正常进行。

3. 65℃加热灭活线状DNA清除反应的酶。

4. 反应液可以直接使用。如果需要纯化，则将30 uL酶反应溶液转移到一个新的1.5 mL离心管中，再加入60 uL 微量核酸沉淀剂。如果没有使用石蜡油，则直接在30 uL酶反应溶液中加入60 uL 微量核酸沉淀剂。注意：微量核酸沉淀剂有沉淀，取用前需要充分摇匀。

5. 室温15000 g离心10分钟。

6. 弃上清后加自备的75%乙醇1 mL，振荡混匀。

7. 15000 离心3-5分钟，弃上清。

8. 再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的DNA沉淀，可溶于自备超纯水中后直接使用或放-20℃冰箱长期保存。