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柱式粪便RNAout

Column Stool RNAOUT
1290 50次 起订
上海 更新日期:2024-10-31

上海泽叶生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
柱式粪便RNAout
英文名称:
Column Stool RNAOUT
保存条件:
常温运输和保存
纯度规格:
99.99%
产品类别:
分子生物学 RNA纯化

柱式粪便RNAout

产品及特点

由于粪便中有机质含量丰富,对 RT-PCR 等后续反应有极大的抑制作用,所以从粪便中提取高纯度的 RNA 一直是十分棘手的问题。本产品是在基因粪便 RNAout 基础上开发的柱式粪便 RNA 提取产品,它具有下列特点:

1. 操作比非柱式法更加简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。

2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均 OD260/280 一般都在 2.0 左右。

3. 得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 杂交、cDNA 合成等实验。

4. 性价比高于进口的柱式粪便 RNA 提取产品。

5. 试剂无毒无害, 环保。
规格及成分 成 份 编 号 大纸盒包装 
柱式粪便 RNAout 溶液 A LM101109a 50 mL 柱式粪便 RNAout 溶液 B LM101109b 15 mL(棕) 柱式粪便 RNAout 溶液 C LM101109c 50 mL 离心吸附柱 LM60911 50 套 通用洗柱液 LM60408 50 mL RNA 洗脱液 LM71207 10 mL 使用手册 LM101109sc 1 份

运输及保存 常温运输和保存,溶液 B 长期保存需要放 4℃,有效期一年。 

自备试剂 氯仿。

使用方法

1. 称取 0.5-1 g 粪便放入到含液氮的研钵中,迅速将冻成固体的粪便研磨成粉末后。

2. 将粉末转移到 5-15mL 的塑料离心管中(不能使用玻璃离心管),加入 1mL 65℃预热的溶液 A,立即剧烈振荡 20 秒,充分混匀。

3. 将匀浆物转移至干净的 1.5mL 塑料离心管中。

4. 在离心管中加入 0.3 mL 的溶液 B(溶液 B 用前需要摇匀,呈浑浊状)和0.2 mL 自备氯仿,在振荡器上振荡 30 秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。

5. 室温 13000 g 离心 3 分钟,两相间将有约 5-10 毫米厚的细胞破碎物。

6. 将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中,下层有机相和中间层含有 DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。好留下100 uL 上清液不取。

7. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。如果有沉淀产生,千万不要去掉沉淀,一定要把所有的混合物上柱。

8. 将一半的溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到离心吸附柱中,13000g室温离心半分钟,弃穿透液。

9. 将剩下的一半溶液(如果有沉淀,则先混匀)转移到同一离心吸附柱中,13000g 室温离心半分钟,弃穿透液。

10. 加 0.7 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。再加 0.3 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。

11. 室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。

12. 将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中,加入 50-100 uL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。

13. 13000g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。

14. RNA 完整性的电泳检测:由于粪便 RNA 含有肠道上皮细胞和肠道细菌的RNA,它们的分子量大小不一,所以电泳时不会形成清晰的条带。

15. RNA产量产率测定:通过OD260的光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/粪便的用量)。

16. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。

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公司简介

上海泽叶生物科技有限公司是一家服务于生命科学领域的高新技术企业,主要为科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学、材料科学,通用试剂、药物合成试剂、手性化合物、催化剂及配体、分析试剂、生物试剂,检测试剂等等

成立日期 (9年)
注册资本 100万元整
员工人数 1-10人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 贸易,试剂,定制,服务
主营行业 生物化工,有机原料,化学试剂,医药原料,技术服务

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