甲基绿-派络宁染色液

染色剂的配制：染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20mL和B液80mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现配现用。A液避光保存。

产品说明

甲基绿-派洛宁染色液(Methyl Green-Pyronin Staining Solution，也称 MGP染色液)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色或蓝绿色，把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的 DNA 结合，从而产生细胞核染色；而派洛宁可以和细胞浆或核仁中的 RNA 结合，从而可以使细胞浆和核仁被染色。

可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿-派洛宁染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿-派洛宁复染。

一个包装的本染色液至少可以染色 200 个样品。

染色方法:（仅供参考）

1. 样品处理

a. 对于石蜡切片：

二甲苯中脱蜡 5-10 分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡 5-10 分钟。
无水乙醇 5 分钟。
90%乙醇 2 分钟。
70%乙醇 2 分钟。
蒸馏水 2 分钟。

b. 对于冰冻切片：蒸馏水 2 分钟。

 
c. 对于培养细胞：用 4%多聚甲醛固定 10 分钟以上。
蒸馏水洗涤 2 分钟。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2 分钟。

2. 甲基绿-派洛宁染色

对于上述处理好的样品： 甲基绿-派洛宁染色液染色 5 分钟左右(可以根据染色结果和要求调整时间)。 蒸馏水洗涤 2-3 次(每次数秒钟)。

3.脱水、透明、封片或进行其它染色

丙酮脱水 3 次，每次 1-2 秒。换用丙酮/二甲苯(1:1)洗涤 2 次，每次 1-2 分钟。 二甲苯透明 1-2分钟。 换用新鲜的二甲苯，再透明 1-2 分钟。

用中性树胶或其它封片剂封片。

 
显微镜下观察，细胞核呈绿色或蓝绿色，而细胞浆和核仁呈红色或红紫色。

注意事项：

1. 需自备 4%多聚甲醛、70%乙醇和 95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备 90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。

2. 样品数量较多时，可以使用染色架和染色缸，便于操作。

3. 次使用本试剂盒时建议先取 1-2 个样品做预实验。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Methyl green-pyronin (MGP) is a classical histological staining technique using two basic (cationic) dyes for the demonstration and differentiation of DNA and RNA. Methyl green is specific for phosphate radicals in the DNA double helix staining it green-blue. Pyronin does not possess this affinity and binds to the remaining negatively charged RNA staining it red. The method is useful in identifying the distribution of Nissl substance in neuronal cell bodies.