Caspase-8活性测定试剂盒

Caspase-8也称FLICE、MACH或Mch5，通常以酶原的形式存在，凋亡时激活，被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体，进而激活下游caspase-4、6、9、10。
细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-8也称FLICE、MACH或Mch5，通常以酶原的形式存在，凋亡时激活，被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体，进而激活下游caspase-4、6、9、10。试剂盒测定原理基于Caspase-8特异水解其多肽底物Ac-IETD-pNA (N-acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide)，释放出游离的硝基苯胺pNA，后者呈黄色在405 nm具有吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-8的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。

适用：测定哺乳动物组织、细胞caspase-8活性。

组成与储存：
1. 裂解缓冲液： 20 ml ，4 ºC
2. 反应缓冲液： 10 ml ，4 ºC
3. 2 mM Ac-IETD-pNA底物： 0.5 ml，－20 ºC避光
4. 10 mM pNA标准品： 0.5 ml，－20 ºC避光
以上标出的量为100次检测，50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存，1年内稳定。

所需仪器：
酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长：吸收波长405 nm，如不具备也可在400~450 nm范围内测定。