Caspase-2活性测定试剂盒

细胞凋亡属于程序化细胞死亡，可见于各种器官和细胞，在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族，包含10多个成员。Caspase-2也称Ich-1或Nedd-2，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase-2的mRNA具有两种不同剪切变体，其全长mRNA翻译的蛋白可促进凋亡，而短蛋白产物则可抑制凋亡。Caspase 2可以被Caspase-1、3和granzyme B激活。试剂盒测定原理基于Caspase-2特异水解其多肽底物N-acetyl-Val-Asp-Val-Ala-Asp-pNA (Ac-VDVAD-pNA)，释放出游离的硝基苯胺pNA，后者呈黄色在405 nm具有吸收峰，用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-2的水解活性。反应体系100微升，试剂盒提供的试剂，除标准曲线外可进行50或100次样品测定。

适用：测定哺乳动物组织、细胞caspase-2活性。

组成与储存：
1. 裂解缓冲液： 20 ml ，4 ºC
2. 反应缓冲液： 10 ml ，4 ºC
3. 2 mM Ac-VDVAD-pNA底物： 0.5 ml，－20 ºC避光
4. 10 mM pNA标准品： 0.5 ml，－20 ºC避光
以上标出的量为100次检测，50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存，1年内稳定。

所需仪器：
酶标仪与96孔酶标板；或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长：吸收波长405 nm，如不具备也可在400~450 nm范围内测定。