5(6)-CFDA, SE

产 品 说 明

中文名称：5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯
英文名称：5(6)-CFDA, SE
产品货号：C-4037-1
产品规格：25 mg
应用范围：荧光标记试剂

产品参数
外观：可溶于DMSO的白色或浅黄色固体
λEx/λEm = 494/521 nm
贮存条件：4℃避光保存
保质期：12个月
分子式：C29H19NO11
分子量：557.47
分子结构图：


产品介绍
5(6)-CFDA, SE是一种可对活细胞进行荧光标记
的细胞示踪染料，不仅可用于细胞增殖的体外实验，
还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。
5(6)-CFDA, SE是二乙酸荧光素（Fluorescein
diacetate，FDA）的衍生物，具有细胞膜渗透性，
本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞
膜进入活细胞后，可被胞浆内的酯酶催化生成羧基
荧光素琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein
succinimidyl ester，CFSE），可发强烈的绿色荧光，
不能穿透细胞膜，能完好的保留在胞内。CFSE还可
CFSE还可自发并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联
到细胞蛋白质上，同时过量且未被偶联的5(6)-CFDA,
SE通过被动扩散回到细胞外培养基内，被后续清洗步骤
所清除。经5(6)-CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常
稳定，稳定标记的时间可达数月，因此非常适用于细胞群
落分析。
5(6)-CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一，优于以前
使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26，并且分裂后的
子代细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中，
CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度
变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1通道）根据
荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次（1/2
的荧光强度），二次（1/4的荧光强度），三次（1/8的
荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE
可检测分裂次数多达八次甚至更多。经5(6)-CFDA, SE标
记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻近
细胞染色的功能。5(6)-CFDA, SE最常用于淋巴细胞的增
殖检测，也可用于成纤维细胞，自然杀伤细胞，造血祖
细胞等其他细胞的增殖检测。
5(6)-CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光，除了流式细胞
仪检测细胞增殖外，还可用荧光酶标板定量活细胞数目，
或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。

使用方法（针对活细胞染色的推荐步骤，可根据实际情
况进行适当调整）
1、用DMSO制备1 mM的5(6)-CFDA, SE溶液。用PBS或
适当的缓冲液将其稀释成10～50 μM的5(6)-CFDA, SE溶液。
2、根据实验要求，用适当药物处理细胞。
3、离心收集细胞，调整细胞浓度为1～5×105个/管。
4、用500 μL的5(6)-CFDA, SE工作液悬浮细胞，于室温
或37℃避光孵育10-30分钟。
5、吸除5(6)-CFDA, SE 染液，用PBS或其他合适缓冲液清洗
细胞，用500 μL预热PBS或培养液悬浮细胞。
6、用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察细胞。

注意事项
1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减
缓荧光淬灭。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套
操作。

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