Karnovsky固定液

Karnovsky固定液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，主要成分含能快速渗透的多聚甲醛和缓慢渗透的戊二醛。它能很好保存组织的抗原性和精细结构，故尤其适用于电镜免疫化学样品的固定。本产品是在Karnovsky原始配方的基础上修改而得，它具有下列特点：

１．既可用于灌注法固定，也可用于浸泡法固定。

２．渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。

３．适用范围广，可以用于固定从细菌、真菌，植物到动物的各种生物材料。

４．对原始配方进行了改良，不使用有毒的含砷化合物，减少了对操作者的毒害。

５．固定的组织经过包埋切片等处理用既可用于光学显微镜检测，也可用于电子显微镜检测。

操作步骤：

１．对动物，最后先灌注固定，然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料，直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky固定液中的材料可以在4℃放置5年。

２．固定后的组织洗涤后即可用于包埋、切片、染色、检测等后续操作。

Karnovsky固定液固定时的注意事项：

(1)固定液量：20倍于材料的体积，以免固定液被稀释。

(2)选择合适的固定液：渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中，又不使组织过度收缩或膨胀。

(3)固定的时间要合适：

与材料的大小和温度有关：材料大则时间长，材料小则时间短；温度高则时间短，温度低则时间长。

经固定的材料如不及时使用，可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时，再换入一次70%酒精，在0-4℃冰箱内可保存半年。经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次，效果较好。

Karnovsky固定液固定的条件：

(1)迅速渗入组织，杀死原生质。在杀死的短时期中，细胞形态不致有所变化。

(2)必须具有渗透力，对组织各部分的渗透力相等，可使组织内外完全固定。

(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。

(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。

(5)增加细胞内含物的折光程度，易于鉴别。

(6)增加媒染作用和染色能力。

(7)使组织变硬，具有一定的硬度。

(8)固定以后能起到保存的作用。

(9)在凝固原生质以后，增加细胞对于各种穿透的抵抗力，不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。

存储与运输：常温运输，2-8℃冷藏保存。

有效期12个月。