"PT-67 Cell<小鼠逆转录病毒包装细胞系>
细胞形态特性:详见细胞说明书
68524-30-1
细胞生长特性:贴壁生长
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
PT-67 Cell<小鼠逆转录病毒包装细胞系>
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
COS-1细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞源自CV-1细胞株,经转染编码野生型T抗原、起始点缺陷突变的SV40得到;细胞中整合有SV40基因组完整早期区段的单个拷贝。该细胞表达T抗原,适用于需要SV40T抗原表达的载体的转染;保留SV40溶细胞性生长的特性;支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制;支持早期区段缺失的SV40纯体的复制。因含有SV40的DNA序列,该细胞需要在2级生物安全柜中操作。
Ketr-3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍
PIEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:髋动脉;内皮细胞
HS578T细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
RPE细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
SW 1088[SW-1088,SW1088]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SUME-a细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
HCC-LY5细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
HeLa[Chang Liver]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
EFM-192B细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
IGROV-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞传代方法:1:2传代
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HNE-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:鼻咽癌
EJ138细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:膀胱癌;女性
DMS153[DMS153]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
SK-N-BE(2)-C细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:神经母细胞瘤;骨髓转移;男性
HIT-T15细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胰岛β细胞;SV40转化
Caki-2细胞系;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞源自一位69岁白人男性的初期肾腺癌组织
KYSE-410细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:食管鳞癌;男性
HMVEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:微血管;内皮细胞
EAhy926细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
RPMI 2650细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
P30/OHK细胞系;细胞传代方法:10^5 cells/60mm dish;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
LIXC-003细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
HFTF细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚胎;眼;成纤维细胞
ARO细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:甲状腺癌;女性
NCM356细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
DU-145细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
RPTEC Cell细胞系;细胞传代方法:1:3—1:4传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
NCI-H810细胞系;细胞传代方法:1:2-1:6传代,每周2-3次;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
WM-266-4细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
L-363细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
PG细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:巨细胞肺癌
Huh-7.5.1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌;男性
Nb2-11细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:恶性淋巴瘤;雄性;Nb
COC1细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞背景资料:详见相关文献介绍
TGBC11TKB细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
EAC-E2G8细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁;细胞背景资料:腹水瘤
CAL-62细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
FRO细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:未分化甲状腺癌;男性
PT-67 Cell<小鼠逆转录病毒包装细胞系>
NGEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胃黏膜;上皮细胞
BEL-7402细胞系;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:BEL-7402细胞株是1974年从临床肝癌手术标本中建立的。
ROS1728细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
HEC1-A细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
Walker256-TC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:乳腺癌;雌性
HaCaT细胞系;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
Anip973细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺腺癌
DMS-153细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:聚团悬浮;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
Kit225细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
Hela-s3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞是1955年由PuckTT,MarcusPI和CieciuraSJ建系的,含HPV-18序列;角蛋白阳性;可用于与染色体突变、细胞营养、集落形成相关的哺乳动物细胞的克隆分析。
NCI-H1341细胞系;细胞传代方法:3-4天换液1次;细胞形态特性:圆形细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
PMVEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺微血管;内皮细胞
293AD细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚肾;5型腺病毒转化;女性
Walker256细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:腹水癌
HM细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:小神经胶质细胞
MT2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:T淋巴细胞白血病
DOK细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:口腔异常增生;男性
NS-1细胞系;细胞传代方法:1:2传代,3天内可长满;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:这是P3X63Ag8(ATCCTIB-9)的一个不分泌克隆。Kappa链合成了但不分泌。能抗0.1mM8-氮杂鸟嘌呤但不能在HAT培养基中生长。据报道它是由于缺失了3-酮类固醇还原酶活性的胆固醇营养缺陷型。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。
McCoy细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:成纤维细胞
Jurkat(clone E6-1)细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:该细胞是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat细胞株来源于一个14岁男孩的外周血;经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体中的一种诱导后可产生大量IL-2(IL-2的产生需两种类型的诱导剂);表达T细胞受体、CD3。
Hs865.Sk细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
C-33A细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:该细胞系由Auersperg N建立,源于宫颈癌活检标本。p53 +,pRB +,在273位密码子发生点突变。乳头状瘤病毒DNA、RNA阴性。
PMVEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肺微血管;内皮细胞
Pcc4细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
PT-67 Cell<小鼠逆转录病毒包装细胞系>
AtT-20细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
NCI-N87[N87]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
CCD 841 CoN细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠上皮细胞;女性
NCI-H1435细胞系;细胞传代方法:1:3-1:6传代,每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁生长,松散;细胞背景资料:详见相关文献介绍
SW 1088[SW-1088,SW1088]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
COLO-678细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
ED-25细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
PLC-PRF-5细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
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