MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞

"MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞
HS-C03６６９２１
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞传代培养实验：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以１:２或１:３以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养；细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增３～６次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/１００个细胞。一般细胞分裂指数介于０.２％～０.５％，肿瘤细胞可达３～５％；细胞接种２～３天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。实验步骤：１.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置５～１０分钟。２.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入３～５ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。３.将细胞悬液吸出２ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加３ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。一般情况，传代后的细胞在２小时左右就能附着在培养瓶壁上，２～４天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到６３%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，９５%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
UWB１.２８９+BRCA１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
NBL-S细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
WPMY-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成肌细胞；细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
QBC９３９细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Raw２４６.７细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCE-T细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCI-H７１９细胞系；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
VCaP细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
WISH细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：４传代，每周２-３次。
NCI-H２９５R细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
VP３０３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１６１８[H１６１８]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞
DITNC１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维母细胞样；细胞传代方法：１：２传代
EB１细胞系；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：１：２传代
COLO-２０１细胞系；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
L６５６５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Htori-３细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hela２９９细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HMrSV５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
OCI-AML３细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SUP-M２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H２０３０[H２０３０]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HLF-a细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PC-１２[PC１２]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SL-２９细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HN６细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LA７９５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A-４３１[A４３１]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
sf９细胞系；细胞生长特性：混合生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：５传代；２-３天换液１次。
Kupffer细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
ECA１０９细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
Mo７e细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
HGMC细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Ca Ski细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
６３９V细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HuTu ８０细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２—１：５传代，每周换液２-３次
COR-L２６细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
TCCSUP细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：１：２-１：３传代，２-３天换液１次。
NCI-H２１２６[H２１２６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A-３７５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
IM９５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HMCB细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：１：６—１：１０传代，２天换液１次
Okul BclxL C３细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：１：２传代
OE-３３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
OVISE细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
U１３８细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
tpc-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
LIXC-０１２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RGM-１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１７７０细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：随细胞的生长而换液
RBVEC细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BT５４９细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CPA ４７细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HO-８９１０细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
H１４３７细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCT１１６细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCC-９５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KFB细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LM-３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RC-K８细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
STC-１细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PANC-２８细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周２-３次。
CMEC细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BCP-１细胞系；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：维持细胞浓度在２×１０５/ml-１×１０６/ml；根据细胞浓度每２-３天补液１次。
HCO细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１３８５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RASMCs细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK[NBL-2]细胞系|犬肾细胞
HCC-４４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Okul BclxL C３细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：１：２传代
BMU-S１细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
B１６-F０细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HARA-B细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
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