BT-474[BT474]细胞系|人乳腺导管癌细胞

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HS-C03６６９０４
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度增高，pH值改变，部分蛋白质由于上述原因而变性，引起细胞内部空间结构紊乱，溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶，使细胞内结构成分造成破坏，线粒体肿胀，功能丢失，并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变，使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多，随冷冻温度的降低，冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤，而致细胞死亡。因此，细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分，减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质分子量小，溶解度大，易穿透细胞，可以使冰点下降，提高细胞膜对水的通透性，且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外，减少胞内形成冰结晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BT-474[BT474]细胞系|人乳腺导管癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于３７°C水槽中回温，回温后喷以７０%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入３７°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取１０ml培养基加至T２５或T７５flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T２５或T７５flask内之培养基，混合均匀，放入３７°C，５%CO２培养箱培养。对绝大多数细胞而言，１%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入５-１０ml培养基中，离心３００xg(约１０００rpm)，５分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入３７°C，５%CO２培养箱培养。
SNU-３５４细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
MDA-MB-１７５细胞系；细胞生长特性：松散贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２—１：６传代，每周换液２—３次
HTR-８细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
NCI-H１６９４[H１６９４]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HBVAF细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HUH-７.５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞形态特性：详见细胞说明书
A３７５细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
２５３J-BV细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SNU-４２３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
TM３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
HCMEC-D３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NRK-４９F细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BT-474[BT474]细胞系|人乳腺导管癌细胞
UACC-８９３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Caco-２细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KATO Ⅲ细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LIXC-０１１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
３T６-Swissalbino细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HME４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H９２９细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
IGROV-１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
L１３２细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
OE-３３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
HAC-８４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCM细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BV１７３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A-７２细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NAMALWA细胞系；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：１：２传代。３天内可长满。
G-２９２, clone A１４１B１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：４—１：８传代；每周换液２-３次
hADSCs细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hs ２７４.T细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：２传代,每周换液２-３次。
NCI-H２１７１[H２１７１]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HOEC细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KM９３３细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CAL ２７细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２-１：４传代；２-３天换液１次
CCD ８４１ CoN细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H２１７０细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：１：３—１：６传代，３—５天换液１次
８５０５C细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：６传代
Hep ３B(Hep ３B２.１-７)细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SL-１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HTR８-SVneo细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hela２９９细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
UACC-８１２细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：３传代；５-７天１次。
IMR-３２细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：存在两种细胞类型，小的神经母细胞样细胞和大的透明成纤维样细胞；细胞传代方法：１：２传代
SW ９５４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hela细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：３传代，２-３天换液一次
HPNC细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Jiyoye细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：每周２-３次。
SW２６０细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MEL细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CTV-１细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
EC８７１２１４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LK-２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H４４１[H４４１]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PA-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：１：４-１：１０传代；每周２-３次。
SW１９９０细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H２１４１细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞传代方法：３-４天换液１次。
Hce-８６９３细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HaCaT细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：３—１：６传代，每周换液２—３次
MIHA细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW １０８８[SW-１０８８,SW１０８８]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LK-２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
C６４３细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
OVISE细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CV-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：１：２传代
NB１-RGB细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCE-２ [５０.B１]细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RPPVEC细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
FAK+/+细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：４-１：８传代； 
BT-474[BT474]细胞系|人乳腺导管癌细胞
JEG-３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化３-５分钟，１：２,３天内可长满
SW ９５４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BC-０２８细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
３T３L１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
T/G HAVSMC细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
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