GST标签蛋白纯化试剂盒

      碧云天生产的GST标签蛋白纯化试剂盒(GST-tag Protein Purification Kit)，俗称GST柱试剂盒，是一种采用了新型的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化GST标签蛋白的试剂盒。
      试剂盒提供了GST标签蛋白纯化所需的相关试剂和亲和层析柱空柱管，为GST标签蛋白的纯化带来了极大的便利。
      GST，即谷胱甘肽-S-转移酶，与目的蛋白融合表达后，被称为GST标签重组蛋白、GST标签蛋白或GST融合蛋白。GST标签重组蛋白可以通过GST特异性地结合到BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，而其它蛋白则不能被结合，含GST标签的重组蛋白可被过量的还原型谷胱甘肽(GSH)溶液洗脱，从而实现GST标签蛋白的分离和纯化。由于纯化过程始终保持在温和的非变性条件下，得到的目的蛋白可以保持其自身的生物学活性，因此可以用于常规的结构和功能研究、抗体制备、以及蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。
      本试剂盒不仅可以用于大肠杆菌表达的GST标签重组蛋白的纯化，也可以用于哺乳动物细胞、昆虫细胞及杆状病毒等其它表达系统中表达的GST标签重组蛋白。
      GST标签重组蛋白在大肠杆菌中表达时具有可溶性高，并且容易保持目的蛋白完整活性等优点。许多真核蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式表达的，但当它们在大肠杆菌中与GST融合表达时，相当一部分可以实现可溶性表达，从而有利于后续的纯化。
      如果在GST标签和目的蛋白之间含有位点特异性的蛋白酶识别位点，如PreScission Protease, TEV Protease或Thrombin等，则可用相应的蛋白酶切除GST标签。
      通常在目的蛋白的N端加上GST标签可以保留GST的酶活性，从而便于使用BeyoGold™ GST-tag Purification Resin进行GST标签重组蛋白的纯化。
      本试剂盒中的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质，并使用了进一步优化的接臂和GSH偶联技术，可以高容量、高特异性地结合GST标签重组蛋白。和目前市售的大多数同类产品相比，非特异性蛋白结合更低，耐受压力更强，GSH的偶联更加稳定。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的压力为0.025MPa，约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin储存在20%乙醇中，10ml总体积中5ml为凝胶，5ml为液体。使用时宜把凝胶充分重悬后再吸取。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin对含GST标签重组蛋白的结合容量大，其对GST结合量为5-6mg蛋白/毫升凝胶，与国际知名品牌的同类产品结合容量相当。实际使用时的结合量取决于待纯化的GST标签重组蛋白的分子量大小，分子量越大则结合容量越大，分子量越小则结合容量越小。对于目的蛋白分子量为50kD的GST标签重组蛋白，每毫升凝胶的实际纯化量约为8-12mg，对于目的蛋白分子量为100kD的GST标签重组蛋白，每毫升凝胶的实际纯化量约为12-18mg。但对于分子量相同的蛋白，也会因为蛋白本身特性的不同，结合的容量也会有所不同。
      一个包装的本产品最多可纯化10种带有GST标签的重组蛋白，每种蛋白的纯化量约为12mg。对于目的蛋白分子量为50kD的GST标签重组蛋白，一个包装的本产品实际最多可纯化10种约4-6mg蛋白。在不使用亲和层析柱空柱管的情况下，参考本说明书，本试剂盒足够进行500次的小量GST标签蛋白纯化。
包装清单：

保存条件：
      4℃保存，至少一年有效。除BeyoGold™ GST-tag Purification Resin外，其余均可以-20℃保存。
注意事项：
      请勿在-20℃或更低温度冷冻保存BeyoGold™ GST-tag Purification Resin。
      BeyoGold™ GST-tag Purification Resin保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
      碧云天有多种不同容量的亲和层析柱空柱管(FCL01/FCL03/FCL06/FCL12/FCL30/FCL60)，可以和本产品配合使用。
      若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物，可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
      GST标签蛋白的纯化应始终保持在非变性条件下，如果融合蛋白以包涵体形式表达，在使用8M尿素或6M盐酸胍溶解包涵体后，需要通过透析去除尿素和盐酸胍并使蛋白复性后才能使用本产品进行纯化。
      蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4℃或冰浴，以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解，可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的P1025/P1026蛋白酶抑制剂混合物(细菌抽提用)，或P1005/P1006蛋白酶抑制剂混合物(通用型)。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。