| 产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
| D2621-100μg |
pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) |
100μg |
1086.00元 |
pCMV-C-BFP是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含BFP(Blue FluorescentProtein,蓝色荧光蛋白)标
签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个BFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有BFP标签的融合蛋白。利用BFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用BFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。BFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测BFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-BFP质粒的主要信息如下：
|
Feature Nucleotide
|
Position
|
|
CMV promoter
|
1-602
|
|
T3 promoter and T3 primer binding site
|
620-639
|
|
Multiple cloning site
|
651-740
|
|
BFP
|
741-1460
|
|
T7 promoter and T7 primer binding site
|
1510-1531
|
|
SV40 polyA signal
|
1543-1926
|
|
f1 origin of ss-DNA replication
|
2064-2370
|
|
bla promoter
|
2395-2519
|
|
SV40 promoter
|
2539-2877
|
|
Neomycin/kanamycin resistance ORF
|
2912-3703
|
|
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
|
3704-4162
|
|
pUC origin
|
4291-4958
|
pCMV-C-BFP质粒(5010bp)的图谱如下：
pCMV-C-BFP的多克隆位点的详细图谱如下：
|
SmaI PstI
|
|
|
|
SacI SacII NotI XmaI BamHI HindIII
|
|
651
|
GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
CCGCTCTAGC
|
CCGGGCGGAT
|
CCAAGCTTCT
|
|
|
CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
GGCGAGATCG
|
GGCCCGCCTA
|
GGTTCGAAGA
|
|
|
|
EcoRI EcoRV SalI BglII XhoI XbaI BFP
|
|
|
|
701
|
GCAGGAATTC
|
GATATCGTCG
|
ACAGATCTCT
|
CGAGTCTAGA
|
|
|
|
|
|
CGTCCTTAAG
|
CTATAGCAGC
|
TGTCTAGAGA
|
GCTCAGATCT
|
|
|
|
|
|
|
751
|
AGGGCGAGGA
|
GCTGTTCACC
|
GGGGTGGTGC
|
CCATCCTGGT
|
|
|
|
|
|
TCCCGCTCCT
|
CGACAAGTGG
|
CCCCACCACG
|
GGTAGGACCA
|
|
|
|
|
801
|
GGCGACGTAA
|
ACGGCCACAA
|
GTTCAGCGTG
|
TCCGGCGAGG
|
|
|
|
|
|
CCGCTGCATT
|
TGCCGGTGTT
|
CAAGTCGCAC
|
AGGCCGCTCC
|
|
|
|
|
851
|
TGCCACCTAC
|
GGCAAGCTGA
|
CCCTGAAGTT
|
CATCTGCACC
|
|
|
|
|
|
ACGGTGGATG
|
CCGTTCGACT
|
GGGACTTCAA
|
GTAGACGTGG
|
|
|
|
|
901
|
TGCCCGTGCC
|
CTGGCCCACC
|
CTCGTGACCA
|
CCCTGAGCCA
|
|
|
|
|
|
ACGGGCACGG
|
GACCGGGTGG
|
GAGCACTGGT
|
GGGACTCGGT
|
|
|
|
|
951
|
TGCTTCAGCC
|
GCTACCCCGA
|
CCACATGAAG
|
CAGCACGACT
|
|
|
|
|
|
ACGAAGTCGG
|
CGATGGGGCT
|
GGTGTACTTC
|
GTCGTGCTGA
|
|
|
|
|
1001
|
CGCCATGCCC
|
GAAGGCTACG
|
TCCAGGAGCG
|
CACCATCTTC
|
|
|
|
|
|
GCGGTACGGG
|
CTTCCGATGC
|
AGGTCCTCGC
|
GTGGTAGAAG
|
|
|
|
|
1051
|
ACGGCAACTA
|
CAAGACCCGC
|
GCCGAGGTGA
|
AGTTCGAGGG
|
|
|
|
|
|
TGCCGTTGAT
|
GTTCTGGGCG
|
CGGCTCCACT
|
TCAAGCTCCC
|
|
|
|
|
1101
|
GTGAACCGCA
|
TCGAGCTGAA
|
GGGCATCGAC
|
TTCAAGGAGG
|
|
|
|
|
|
CACTTGGCGT
|
AGCTCGACTT
|
CCCGTAGCTG
|
AAGTTCCTCC
|
|
|
|
|
1151
|
CCTGGGGCAC
|
AAGCTGGAGT
|
ACAACTTCAA
|
CAGCCACAAC
|
|
|
|
|
|
GGACCCCGTG
|
TTCGACCTCA
|
TGTTGAAGTT
|
GTCGGTGTTG
|
|
|
|
|
1201
|
TGGCCGACAA
|
GCAGAAGAAC
|
GGCATCAAGG
|
CGAACTTCAA
|
|
|
|
|
|
ACCGGCTGTT
|
CGTCTTCTTG
|
CCGTAGTTCC
|
GCTTGAAGTT
|
|
|
|
|
1251
|
AACATCGAGG
|
ACGGCAGCGT
|
GCAGCTCGCC
|
GACCACTACC
|
|
|
|
|
|
TTGTAGCTCC
|
TGCCGTCGCA
|
CGTCGAGCGG
|
CTGGTGATGG
|
|
|
|
|
1301
|
CCCCATCGGC
|
GACGGCCCCG
|
TGCTGCTGCC
|
CGACAGCCAC
|
|
|
|
|
|
GGGGTAGCCG
|
CTGCCGGGGC
|
ACGACGACGG
|
GCTGTCGGTG
|
|
|
|
|
1351
|
CCCAGTCCGC
|
CCTGAGCAAA
|
GACCCCAACG
|
AGAAGCGCGA
|
|
|
|
|
|
GGGTCAGGCG
|
GGACTCGTTT
|
CTGGGGTTGC
|
TCTTCGCGCT
|
|
|
|
|
1401
|
CTGCTGGAGT
|
TCGTGACCGC
|
CGCCGGGATC
|
ACTCTCGGCA
|
|
|
|
|
|
GACGACCTCA
|
AGCACTGGCG
|
GCGGCCCTAG
|
TGAGAGCCGT
|
|
|
|
|
ApaI
|
|
|
|
1451
|
|
GGGCCCGGTA
|
CCTTAATTAA
|
TTAAGGTACC
|
AGGTAAGTGT
|
|
|
|
CCCGGGCCAT
|
GGAATTAATT
|
AATTCCATGG
|
TCCATTCACA
|
|
|
pCMV-C-BFP中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-BFP)包括：
|
AclI
|
AfeI
|
AflII
|
AgeI
|
AhdI
|
AscI
|
AsiSI
|
|
BaeI
|
BbsI
|
BbvCI
|
BlpI
|
BmgBI
|
BsiWI
|
BsmBI
|
|
BspEI
|
BspQI
|
BssHII
|
BstEII
|
BstZ17I
|
EarI
|
EcoNI
|
|
FseI
|
NruI
|
PflMI
|
PmeI
|
PmlI
|
PpuMI
|
PshAI
|
|
PspXI
|
SapI
|
Sbf I
|
ScaI
|
SgrAI
|
SpeI
|
SwaI
|
|
XcmI
|
XmnI
|
|
pCMV-C-BFP中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-BFP once)包括：
|
NdeI
|
CA`TA,TG
|
240
|
|
ApaII
|
G,GGCC`C
|
1461
|
|
SnaBI
|
TAC|GTA
|
346
|
|
PvuI
|
CG,AT`CG
|
1541
|
|
CspCI
|
,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`
|
380
|
|
BclI
|
T`GATC,A
|
1697
|
|
NheI
|
G`CTAG,C
|
597
|
|
MfeI
|
C`AATT,G
|
1790
|
|
BmtI
|
G,CTAG`C
|
597
|
|
HpaI
|
GTT|AAC
|
1803
|
|
SacI
|
G,AGCT`C
|
651
|
|
BtsI
|
GCAGTG,NN`
|
1877
|
|
Eco53kI
|
GAG|CTC
|
653
|
|
MluI
|
A`CGCG,T
|
1926
|
|
BstXI
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
659
|
|
BsaXI
|
,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`
|
2087
|
|
SacII
|
CC,GC`GG
|
660
|
|
DraIII
|
CAC,NNN`GTG
|
2153
|
|
NotI
|
GC`GGCC,GC
|
668
|
|
SfiI
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2812
|
|
TspMI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
StuI
|
AGG|CCT
|
2861
|
|
XmaI
|
C`CCGG,G
|
680
|
|
ClaI
|
AT`CG,AT
|
2880
|
|
SmaI
|
CCC|GGG
|
682
|
|
BspDI
|
AT`CG,AT
|
2880
|
|
BamHI
|
G`GATC,C
|
687
|
|
KasI
|
G`GCGC,C
|
3039
|
|
HindIII
|
A`AGCT,T
|
693
|
|
NarI
|
GG`CG,CC
|
3040
|
|
PstI
|
C,TGCA`G
|
699
|
|
SfoI
|
GGC|GCC
|
3041
|
|
EcoRI
|
G`AATT,C
|
705
|
|
PluTI
|
G,GCGC`C
|
3039
|
|
EcoRV
|
GAT|ATC
|
713
|
|
MscI
|
TGG|CCA
|
3122
|
|
SalI
|
G`TCGA,C
|
717
|
|
Tth111I
|
GACN`N,NGTC
|
3158
|
|
AccI
|
GT`MK,AC
|
718
|
|
PflFI
|
GACN`N,NGTC
|
3158
|
|
BglII
|
A`GATC,T
|
723
|
|
BsrDI
|
GCAATG,NN`
|
3271
|
|
XhoI
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
RsrII
|
CG`GWC,CG
|
3556
|
|
PaeR7I
|
C`TCGA,G
|
729
|
|
BstBI
|
TT`CG,AA
|
3722
|
|
XbaI
|
T`CTAG,A
|
735
|
|
BsaI
|
GGTCTCN`NNNN,
|
4029
|
|
BcgI
|
,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`
|
829
|
|
ApaLI
|
G`TGCA,C
|
4644
|
|
BsrGI
|
T`GTAC,A
|
1450
|
|
PciI
|
A`CATG,T
|
4958
|
|
PspOMI
|
G`GGCC,C
|
1461
|
|
|
pCMV-C-BFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
T3 primer (620-639): 5′-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3′
C-BFP primer (852-873): 5′- GGGTCAGCTTGCCGTAGGTGGC -3′
pCMV-C-BFP的全序列信息：D2621 pCMV-C-BFP-seq.txt
pCMV-C-BFP质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-C-BFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片，右侧为荧光照片。
包装清单：
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
D2621-1μg
|
pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)
|
1μg
|
|
D2621-100μg
|
pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白)
|
100μg
|
|
—
|
说明书
|
1份
|
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
