RA-FLSs[类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞]

"RA-FLSs[类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞]
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
619-42-1
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞生长特性：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
RA-FLSs Cell细胞背景资料：关节；成纤维细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CNE细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：此细胞株来源于一位58岁女性鼻咽癌患者。
RPMI 1846细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
UO31细胞系；细胞传代方法：1：3-1：6传代；2-3天换液1次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MKN-74细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HelaS3细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HOCF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脉络膜；成纤维细胞
Myla 2059细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：皮肤；T淋巴细胞瘤
hRPE细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：视网膜；色素上皮细胞
THLE-3细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
U-138MG细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：星形细胞瘤；男性
TE354.T细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
IOSE-29细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢；上皮细胞；女性
SP2/MIL-6细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
JF-305细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H1155细胞系；细胞传代方法：每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
OS-RC-2细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：来源于日本人的肾脏肿瘤细胞。 可以移植到裸鼠。
L6565细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CNE2细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：1983年由谷淑燕、孔繁裔等建系；源自人鼻咽低分化鳞癌组织；原代细胞胰蛋白酶消化，48小时开始生长，首次传代20天。裸鼠体内移植100%成瘤。
MKN-28(MKN-74)细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：STR分型鉴定确定MKN28细胞来源于MNK74细胞，MKN74细胞为中等分化腺癌细胞，曾经为亚二倍体，细胞生长缓慢。
HPMEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺微血管；内皮细胞
MAC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：皮肤T淋巴瘤；女性
HCT-8 [HRT-18]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：结肠腺癌；男性
EAC-E2G8细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：腹水瘤
AD293细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SW 1990细胞系；细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Romas细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SW1088细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：星形胶质瘤；男性
BAEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：主动脉；内皮细胞
R3/1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺；Ⅰ 型上皮细胞
STC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：STC-1细胞来源于双重转基因小鼠的肠肿瘤组织。含有连接大鼠胰岛素基因启动子与多瘤病毒小T抗原的融合基因与含有连接大鼠胰岛素基因与SV40的基因结合产生双转基因小鼠。这些小鼠一般患有肠肿瘤以及胰腺β细胞瘤。STC-1细胞产生激素分泌素。
HAmEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HCT116细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
PANC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周2-3次；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：这株人胰腺癌细胞株源自于胰腺癌导管细胞，其倍增时间为52小时。染色体研究表明，该细胞染色体众数为63，包括3个独特标记的染色体和1个小环状染色体。该细胞的生长可被1unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制；能在软琼脂上生长；能在裸鼠上成瘤。
HIEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肠；上皮细胞
HCECs细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HMSC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：骨髓间充质干细胞
PAXC-002细胞系；细胞传代方法：1：3传代，3-4天传1次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HM细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：小神经胶质细胞
NCI-H2085细胞系；细胞传代方法：1：3-1：6传代 ；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MM96L细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：黑色素瘤；淋巴结转移；女性
NCI-H1048[H1048]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
TE-11细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
ChaGo-K-1细胞系；细胞传代方法：1：4-1：8传代；每周换液2次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
TH1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：调节T细胞
Z310细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脉络从；上皮；SV40永生化；SD大鼠
T-HSC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝星形细胞；SV40转化；SD大鼠
HEC-1-A细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：这株细胞及其亚株HEC-1-B是H.Kuramoto及其同事1968年从一位IA期子宫内膜癌患者身上分离得到的。PAF可以诱导其c-fos的表达。
SV-HUC-1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MC3T3-L1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CRL-2780细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
PANC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周2-3次；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：这株人胰腺癌细胞株源自于胰腺癌导管细胞，其倍增时间为52小时。染色体研究表明，该细胞染色体众数为63，包括3个独特标记的染色体和1个小环状染色体。该细胞的生长可被1unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制；能在软琼脂上生长；能在裸鼠上成瘤。
CCC-HEH-2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：心肌
COLO-824细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CL-34细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
BCECs细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脑；毛细血管；内皮细胞
MRC-5细胞系；细胞传代方法：1：2-1：5传代；每周1-2次；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织，该细胞老化前能传代42~46个倍增时间。
FD-LSC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：喉鳞癌；男性
MAEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：主动脉；内皮细胞
Neuro-2aN2a细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CHP-100细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HTEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
AR42J细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：在肾上腺皮质激素刺激下可诱导出外分泌活性，并伴有广泛的内质网重构。
NCI-H1869细胞系；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
APRE-19细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SG231细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝内胆管癌；男性
HEC1-A细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Fox-NY细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Myla 2059细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：皮肤；T淋巴细胞瘤
R2C细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：睾丸间质瘤；雄性；Wistar Furth
HRC-99细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SPA-A1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HTEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
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