PIG3[白癜风人皮肤黑色素细胞]

"PIG3[白癜风人皮肤黑色素细胞]
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
99-86-5
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞生长特性：贴壁
贴壁细胞冻存注意事项：细胞冻存液需提前配制，不可直接将DMSO加入细胞悬液中；不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态，冻存密度可根据细胞特性进行调整；冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤：从培养箱中取出准备冻存的细胞；显微镜下观察细胞状态并拍照记录；酒精消毒培养瓶后放入安全柜中；吸去多余的培养基，加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；将细胞悬液移入15ml离心管中离心，1000rpm/min（约200g）离心3-5min；吸去多余的液体，向细胞沉淀中加入适量的冻存液，轻轻吸打混匀；按比例分装至冻存管中；贴好标签后放入梯度冻存盒中；将冻存盒放入-80℃，降温过夜后，移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项：将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用；程序降温盒复温至室温备用。
PIG3 Cell细胞背景资料：皮肤；黑色素细胞
细胞冻存的步骤：１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为５×１０６～１×１０７/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；３)将分装上述细胞悬液于２ml冻存管中，每管０.２５ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；４)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-８０℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-８０℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后转到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。
细胞形态特性：详见细胞说明书
Hs 606.T细胞系；细胞传代方法：1：2—1：3传代，2—3天换液一次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HO-8910PM细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：高转移卵巢癌细胞
LL-PK1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
AMO-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：浆细胞骨髓瘤；女性
CHO-K1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：1957年，PuckTT从成年中国仓鼠卵巢的活检组织建立了CHO细胞，CHO-K1是CHO的一个亚克隆。CHO-K1的生长需要脯酸。
KTCTL140/RCC-JF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾透明细胞癌；女性
NCI-H292[H292]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SLK细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肉瘤
SW900细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MH-22A细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝癌；C3HA
HME7细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MM96L细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：黑色素瘤；淋巴结转移；女性
JM1细胞系；细胞传代方法：换液2-3次一周；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
TE15细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SEG1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CRL-2780细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Jurkat(clone E6-1)细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：该细胞是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat细胞株来源于一个14岁男孩的外周血；经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体中的一种诱导后可产生大量IL-2(IL-2的产生需两种类型的诱导剂)；表达T细胞受体、CD3。
SW 1573细胞系；细胞传代方法：1：4-1：10传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
38C13细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：B淋巴瘤；C3H/eB
HL-7702细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
DH82细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾；Golden Retrieve
A875细胞系；细胞传代方法：1：3传代；3-4天1次；细胞形态特性：多角形；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：NGF受体阳性。
NCI-H1341[H1341]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
AM-38细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MUG-Chor1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：骶骨脊索瘤；女性
P31/FUJ细胞系；细胞传代方法：1：5传代；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
GLAG-66细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
U-937细胞系；细胞传代方法：维持细胞浓度在1×105-2×106/ml；根据细胞浓度3-4换液1次；细胞形态特性：单核细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：该细胞是由NilssonK实验室于1974年从一名37岁的患有恶性组织细胞性淋巴瘤的白人男性的胸水中分离建立的。1979年来的研究显示该细胞在人混合淋巴细胞培养物上清、佛波酯、VitD3、γ-IFN、TNF和维A酸的诱导下可以向终末单核细胞分化。该细胞不合成免疫球蛋白，EBV阴性；可产生溶菌酶、β-2-微球蛋白，受PMA刺激后可产生TNF-α；表达C3R；可作转染宿主；表达Fas，对TNF和抗Fas的抗体敏感。
CL-11细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
B16-F1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
JAR细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：JAR细胞株来源于胎盘滋养层肿瘤
HuUVECs-11细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Tsu-Pr1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SW 900[SW-900,SW900]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
BSC40细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾；自发永生
293AD细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胚肾；5型腺病毒转化；女性
SNU-869细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Hs 294T细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次；细胞形态特性：混合星状和多边形；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NK-92细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：NK细胞；淋巴瘤；男性
HHSteC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
A673细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：尤因肉瘤；女性
SW 1353细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2传代。3天内可长满；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：SW 1353细胞最初从一位72岁女性白人的右肱骨原发性II级骨肉瘤中得到。 最初的培养基是含有可的松和胰岛素的L-15添加10%FBS和抗生素。 1982年１月ATCC收到１支传代至12代的冻存管。 
JG细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾小球旁细胞
Hela-s3细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞是1955年由PuckTT,MarcusPI和CieciuraSJ建系的，含HPV-18序列；角蛋白阳性；可用于与染色体突变、细胞营养、集落形成相关的哺乳动物细胞的克隆分析。
NCI-H1341细胞系；细胞传代方法：3-4天换液1次；细胞形态特性：圆形细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
PMVEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺微血管；内皮细胞
293AD细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胚肾；5型腺病毒转化；女性
Walker256细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：腹水癌
Hs 821.T细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MEC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：粘液表皮样癌
MS751细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：这株细胞是J. Sykes于1974年建立的（参考ATCC HTB-33）。有报告称MS751细胞含有人乳头状瘤病毒18 (HPV-18)序列。[22995] [23180]后来发现MS751细胞包含HPV-45基因组的一部分，而其中E6/E7区域表达呈poly(A)+RNA的形式。[49721]
L78细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺腺
CEM-3G-2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
COR-L23细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H441[H441]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU-251细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢内膜癌；腹水转移；女性
OV3121细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
L929细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：亲本L的亚克隆，是最早建立的连续培养物之一，L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+，HPRT+。
CCC-HSF-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：皮肤；成纤维细胞
UT-7细胞系；细胞传代方法：维持细胞浓度在1.0-1.5×106cells/ml，1：2传代，2-3天1次；细胞形态特性：圆形；细胞生长特性：悬浮生长，有1%~2%的细胞可轻微贴壁；细胞背景资料：该细胞于1988年建系；源于一名64岁患有急性粒细胞白血病（AMLM7）的男性的骨髓；对多种细胞因子有反应。
OVCAR8细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢癌；女性
HCMEC-D3细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CL-40细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SW 1353细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2传代。3天内可长满；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：SW 1353细胞最初从一位72岁女性白人的右肱骨原发性II级骨肉瘤中得到。 最初的培养基是含有可的松和胰岛素的L-15添加10%FBS和抗生素。 1982年１月ATCC收到１支传代至12代的冻存管。 
COC1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
BJ细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H226细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：1980年分离建立。
NCI-H1793细胞系；细胞传代方法：1：3-1：6传代 ；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
EB1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
EOL-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：急性髓系白血病；男性
NF639细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：乳腺癌
OVCAR8细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢癌；女性
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