95-D|人高转移肺癌细胞

"95-D|人高转移肺癌细胞

细胞背景资料：这是一株高转移肺癌。

细胞形态特性：上皮样

在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。

95-D Cell

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贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。

95-D|人高转移肺癌细胞

细胞生长特性：贴壁生长

细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)

TC7细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：结肠癌；女性

MDA-MB-231细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III级）。

MEF细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：取孕9天的615小鼠胚胎，去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞，支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时，MEF需经处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时，MEF不要超过6代。

NCI-H28细胞系；细胞传代方法：1：3-1：6传代，每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

BMF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SNU-C2A细胞系；细胞传代方法：每周两次换液；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：松散附着、多单元的聚合；细胞背景资料：详见相关文献介绍

T6-Swiss albino细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系

95-D|人高转移肺癌细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满

RPC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

PC-3M细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 729细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SK-OV-3[SKOV-3,SKOV3]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

OVCAR-3细胞系；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞1982年由T.C. Hamilton等建系，源自一位60卵巢腺癌的腹水，是卵巢癌抗药性研究的模型。

养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。

KP-4细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SNU-719细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胃癌；男性

WISH细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代，每周2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：最初以为这株细胞的起源是正常羊膜，但随后通过同工酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹法分析，证实该细胞是HeLa细胞污染的；角蛋白阳性。

HRPTEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

TT细胞系；细胞传代方法：1：3-1：4传代，每周换液2次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：TT细胞由LeongSS等，自一位77岁白人女性甲状腺髓样癌患者的穿刺活检样本中建立。TT细胞持续产生高水平的降血素和CEA。更换培养基后24h和72h，在培养基中检测到的免疫活性的降血素浓度分别为3900pg/106个细胞和7700pg/106个细胞。72小时后CEA积累浓度超过27ng/106个细胞；该细胞最初是在RPMI1640培养液中培养，可产生神经肽，但还不知道在F12培养液中培养是否会产生。

HPAF-II细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

IHC-ST1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝内胆管癌

HCC-95细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1930[H1930]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HCE1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

EOL-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：急性髓系白血病；男性

hUC-MSC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脐带；间充质干细胞

TE-4细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

MEC57细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hela-cx40细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

95-D|人高转移肺癌细胞

Hep2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

3D4/21细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺泡巨噬细胞；SV40转化；Landrace

NCI-N87[N87]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H1238[H1238]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H2452[H2452]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NFS-60G-CSF细胞系；细胞传代方法：1：3传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NIT-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周换液1-2次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

ASH-3细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Okul BclxL C1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

RTG细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 819.T细胞系；细胞传代方法：1：2—1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HOC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝；卵圆细胞

BMF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HS-578T细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SF17细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NeHepLxHT细胞系；细胞传代方法：1：5-1：10传代，每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCTC clone 929细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

FHs 74 Int细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：小肠

SHZ-88细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SW1417细胞系；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液1-2次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

SRBR3细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

MARC-145细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胚肾；自发永生

NeHepLxHT细胞系；细胞传代方法：1：5-1：10传代，每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

OS-RC-2细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：来源于日本人的肾脏肿瘤细胞。 可以移植到裸鼠。

RKO-AS45-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Mahlavu细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝癌；女性

LSC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝星形细胞；自发永生；Wistar

IA-LM细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H82[H82]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

COLO 205细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-尿嘧啶治疗4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性；产生CEA、IL10。

SW1417细胞系；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液1-2次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

EFM-192C细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

RIN-m细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

1.1B4/PANC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周2-3次；细胞形态特性：上皮样；多角形　；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

RASMCs细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：气道平滑肌

HOSEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢；上皮细胞

NCM460细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HN4细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：喉鳞癌；男性

RBMVEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：脑微血管；内皮细胞

HP615615细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

HepG2[HepG2]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

U937[U-937]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

PBMC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：外周血单核细胞

95-D|人高转移肺癌细胞

DSL-6A/C1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胰腺癌；雄性；Lewis

SK-LU-1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞系源于一位60岁的白人女性患者的肺腺癌组织。

NCI-H660细胞系；细胞传代方法：2-3天换液1次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

NCI-H220[H220]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Myla 2059细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：皮肤；T淋巴细胞瘤

NCM460细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

Hs 729细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍

KBM5细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：慢性髓白血病；女性

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