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  • Xeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红)

Xeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红)

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上海 更新日期:2023-10-24

上海埃泽思生物科技有限公司

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手机:17321495615 拨打
邮箱:service@appliedcell.cn

产品详情:

中文名称:
无血清人间充质干细胞培养基无酚红
品牌:
埃泽思
产地:
上海
保存条件:
基础培养基2-8℃,添加剂-20℃至-80℃;混合后2-8℃
产品类别:
细胞培养基

Xeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红)

产品基本信息

产品名称

Applied CellTMXeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红)

货    号

AC-1001003PRF

规    格

基础培养基450mL,添加剂50mL

运输保存条件

基础培养基2-8℃,添加剂-20℃-80℃;混合后2-8℃

使用范围

人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞

原代分离、扩增与传代培养

保质期

12个月

产品简介

Xeno-Free人间充质干细胞培养基(无酚红)是埃泽思生物(Applied CellTM)自主研发的一款无外源动物成分的人间充质干细胞培养基。可应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养,并保持其多向分化潜能。本产品内毒素水平远低于中国药典标准,生产过程遵循ISO9001体系,并符合GMP指导原则。

Xeno-Free人间充质干细胞培养基主要成分:氨基酸,维生素、无机盐、白蛋白,转铁蛋白、胰岛素、微量元素,细胞因子等。 

产品特性


  • 无外源动物蛋白成分,大大降低各类病毒、霉菌和支原体等的污染风险。


  • 全程无血清生产,极大降低批次间差异。


  • 可用于原代分离,且培养过程无需包被培养板。


  • 扩增效率高,24h左右增殖翻倍,节省培养时间。


  • 内毒素<0.06EU/ml,远低于中国药典水平

 

组分

规格

数量

运输

Human Mesenchymal Stem Cell Basal Medium

人间充质干细胞基础培养基

450mL

1瓶

冰袋

Human Mesenchymal Stem Cell Supplement

人间充质干细胞添加剂

50mL

1瓶

干冰

产品内容

 

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Xeno-Free细胞消化液(Applied CellTM: Cat. no. AC-1001024/1001025 )

实验准备

人间充质干细胞培养基配制


  • 37快速解冻人间充质干细胞培养基添加剂,快速溶解时不易破坏添加剂中营养物质,时间大致为10min。待添加剂融化后摇匀,分装或直接按比例添加到基础培养基中,分装后添加剂立即储存于-20-80℃,避免反复冻融 。

1.2将添加剂以10%比例加入到人间充质干细胞基础培养基混匀,即为人间充质干细胞培养基AC-1001003PRF。混合后培养基可在2-8 稳定储存2-3周,不建议使用已配制超过3周的培养基。

1.3人间充质干细胞培养基可直接应用于人类骨髓、脂肪、脐带等组织来源的间充质干细胞的原代分离、扩增与传代培养。

 

操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)

hMSC细胞复苏(10cm dish)

2.1  从液氮中取出冻存的hMSC细胞,迅速将冻存管放入37℃水浴快速融解。

2.2 在生物安全柜或超净台中,将解冻后的细胞悬液缓慢加入5 mL预温的人间充质干细胞培养基(AC-1001003PRF

2.3 1000rpm 离心3 min,吸掉上清,加入10mL人间充质干细胞培养基重悬细胞。

2.4 将细胞均匀铺到培养皿中,水平十字振动培养皿使细胞均匀分布,5% CO237℃恒温细胞培养箱中培养24小时后观察细胞状态。

2.5 24h后更换新鲜人间充质干细胞培养基继续培养,每2-3天更换培养液。

hMSC细胞传代培养

1. 在显微镜下观察细胞,当细胞融合度达到90%,即可传代。

2. 在超净台/安全柜中,吸掉原有培养基,加入PBS溶液清洗一次,加入Xeno-Free细胞消化液(AC-1001024/1001025使之完全覆盖皿/瓶底。

3. 室温孵育4-5分钟或37℃孵育2-4分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

4. 加入消化液2倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液器轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。

5. 将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min

6. 弃上清,加入人间充质干细胞培养基,重悬细胞,计数。1:3-1:4比例传代,或按1-2x104 cells/cm2  传代均匀铺在培养皿/瓶中,置于37℃5%CO2 培养箱中培养。

注意:细胞传代所需的时间:2-4天。5代及之前的细胞,生长速度较快。5代以后的细胞,生长速度稍缓。

hMSC细胞冻存

1.  细胞达到90%汇合度, 吸掉原有培养基PBS清洗一次。

2. 加入Xeno-Free细胞消化液(AC-1001024/1001025)使之完全覆盖皿/瓶底,室温孵育4-5min或37℃孵育2-4min分钟,显微镜下观察大部分细胞脱离皿底即停止消化。

3. 加入消化液2倍体积的人间充质干细胞培养基,用移液枪轻轻吹打瓶壁上未完全脱离的细胞,并轻轻吹打混匀,使细胞完全分散。

4.   将细胞悬液转移到15 mL离心管中,1000 rpm离心3 min,吸掉上清。

5. 加入适量Serum-Free细胞冻存液AC-1001005/1001006,调整细胞冻存密度在1×106 cells/mL左右,每支冻存管分装1.5-2ml。

6. 直接放入-80℃,24h后转入液氮中长期保存。

质量控制

 

项  目

指  标

澄清度

澄清

颜色

培养基为无色,添加剂为橙黄色

pH

7.0-7.4

渗透压 (mOsmol/kg)

280-330

细菌内毒素(EU/ml)

培养基

<0.06

添加剂

<0.06

细菌,真菌

0.1µm过滤,无菌检测合格

支原体

0.1µm过滤,支原体检测为阴性,

细胞生长试验

细胞形态

细胞为梭形,呈指纹状或旋涡状生长

细胞生长试验

合格




间充质干细胞、间充质干细胞培养基;

公司简介

上海埃泽思生物科技有限公司( Applied Cell?)专注于治疗用及生产用细胞培养产品研发与生产,目前公司产品已经涵盖干细胞、免疫细胞培养,冻存以及分离等领域。为保证产品标准化、一致性,我们对所有产品进行严格的原料筛选及生产控制。目前,我公司已通过ISO9001:2015质量管理体系认证。除提供产品支持,本公司的技术团队还可为您提供及时有效的技术支持、技术咨询,以及与您探讨感兴趣的科学问题和解决方案。最终我们希望通过高品质的产品及服务,不断推动细胞治疗、再生医学以及药物发展与创新,愿我们早日成为您在研发科研及应用领域的忠诚合作伙伴。 公司愿景:  我们努力成为中国细胞培养领域最顶尖产品与服务提供商。 公司使命:

成立日期 (7年)
注册资本 500.0000
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 500万-1000万
经营模式 工厂
主营行业 细胞培养

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