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RNAeasy? Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)

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基本信息:

  • 发布时间: 2019-05-23
  • 产品名称: RNAeasy? Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • 产品英文名称: RNAeasy? Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • CAS号: 
  • 产品包装:  50次
  • 产品价格: 516.00无
  • 有效期: 一年
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  • 保存条件: 
  • 纯度规格: 
  • 产品类别: RNA相关 RNA提取

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RNAeasy? Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)

产品描述:

产品编号
产品名称
产品包装
产品价格
R0032
RNAeasy™ Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)
50次
516.00元

      碧云天的离心柱式RNAeasy™ Plus动物RNA抽提试剂盒(RNAeasy™ Plus Animal RNA Isolation Kit with Spin Column)是一种基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提总RNA的试剂盒。总RNA包括大于200个核苷酸的RNA(也常被称为总RNA)和小于200个核苷酸的小RNA(small RNA)。
      本试剂盒抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验;也可用于基因表达芯片分析(microarray)、高通量测序(high throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。
      碧云天的三款离心柱式及Trizol法RNA抽提试剂盒的主要特点和差异如下:

产品编号
R0024/ R0026/ R0027
R0028
R0032
R0011/R0016
产品名称
RNAeasy™动物RNA
抽提试剂盒
RNAeasy™动物小RNA
抽提试剂盒
RNAeasy™ Plus动物RNA
抽提试剂盒
Beyozol
Trizol
推荐指数
★★★★★
★★★★★
★★★
★★
抽提方式
离心柱式
离心柱式
离心柱式
原始方式
抽提产物
RNA(>200nt)
小RNA(<200nt)
总RNA
(含<200nt的小RNA)
总RNA
(含<200nt的小RNA)
操作时间
最短(15-20分钟)
稍较长(20-25分钟)
较长(25-30分钟)
最长(45-60分钟)
操作步骤
4步骤()
6步骤()
6步骤()
很多步骤
使用便捷性
★★★★★
★★★★
★★★★
★★
推荐细胞量/得率
50-100万/5-20μg
50万/1-2μg
50-100万/5-20μg
50-100万/5-20μg
推荐组织量/得率
5-20mg/10-40μg()
5mg/1-1.5μg()
3-5mg/3-10μg()
50mg/100-500μg(很多)
RNA纯度
有毒有害试剂
人体与环境安全
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用途
非小RNA相关各种用途
小RNA相关各种用途
不同长度RNA各种用途
不同长度RNA各种用途

      动物组织或细胞中的RNA按照长度可以分为长链RNA(long RNA)和小RNA(small RNA),长链RNA通常大于200nt,而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA(ribosomal RNA)、5S rRNA、tRNA(transfer RNA)、microRNA(miRNA)、siRNA(small interfering RNA)、piRNA(Piwi-associated small RNA)、tsRNA(tRNA-derived small RNA)、srRNA(small rDNA-derived RNA)等。
      本试剂盒抽提总RNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解,释放出总RNA与小RNA,通过两次特异性结合体系过同一纯化柱,分别结合>200nt的RNA和<200nt的小RNA,同时有效避免了杂质大量析出而阻塞纯化柱,抽提得到包括>200nt的RNA和小RNA的总RNA,基因组DNA和蛋白等杂质被有效去除,然后通过洗涤去除非特异性结合的蛋白等杂质,最后用洗脱液将总RNA洗脱下来。


图1. 离心柱式总RNA(>200nt的RNA和<200nt的小RNA)抽提流程示意图

      本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的柱纯化介质进行总RNA分离纯化,能有效避免传统的Trizol法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。
      本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒采用柱纯化,无需繁琐的RNA沉淀步骤,抽提操作过程仅25-30分钟。相比于传统的Trizol抽提法,本试剂盒的操作流程显著简化,缩短了抽提时间,降低了RNA降解的风险。
      本试剂盒抽提总RNA的得率高。本试剂盒的抽提效果经反复测试,100万个冻存的HeLa细胞能抽提得到约15-20μg总RNA,5mg冻存的小鼠肝组织能抽提得到约6-10μg总RNA,5mg冻存的小鼠肾组织能抽提得到约3-5μg总RNA。不同来源的样品可能有所差异,通常新鲜样品的得率高于冻存样品。本试剂盒的抽提效果参见图2。

      图2. 本试剂盒总RNA抽提效果。样品为冻存的50万个HeLa细胞、5mg小鼠肝组织和5mg小鼠肾组织。洗脱液用量均为40μl。均取6μl洗脱的样品经变性处理后,在含6.67%甲醛和适量NA-Red的1.2%变性琼脂糖凝胶中电泳约45分钟后拍照。抽提产物的得率依次为9.6μg、8.5μg和4.1μg,A260/A280依次为2.11、2.10和2.09,A260/A230依次为2.01、1.98和1.94。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,本图仅供参考。

注:纯的RNA其A260/A280约为2.0,但在很多仪器上测定时会高于2.0,低于1.9通常认为有蛋白、DNA或者酚等的污染;纯的RNA其A260/A230约为2.0左右或者略高,低于1.9通常认为有碳水化合物、胍盐、多肽或酚等的污染。
      本试剂盒抽提得到的总RNA纯度高,显著优于Trizol方法。抽提得到的总RNA的A260/A280通常为2.0-2.2。A260/A230通常为1.9-2.1。本试剂盒抽提获得的RNA的实测纯度参见图2。
      本试剂盒适用于新鲜或冻存的动物组织或细胞总RNA与小RNA的抽提,推荐的细胞用量为50-100万,组织用量为3-5mg。
      本试剂盒可用于50个样品的总RNA(含小RNA)抽提。
包装清单:

产品编号
产品名称
包装
R0032-1
裂解液
16ml
R0032-2
结合液I
16ml
R0032-3
结合液II
38ml
R0032-4
洗涤液I
32ml
R0032-5
洗涤液II
63ml
R0032-6
洗脱液
5ml
R0032-7
RNA纯化柱及废液收集管
50套
R0032-8
RNA洗脱管
50个
说明书
1份

保存条件:
      室温保存,一年有效。
注意事项:
      对于富含RNase的样品(如动物组织),建议使用前在裂解液中添加二硫苏糖醇(Dithiothreitol, DTT)至终浓度为40mM (例如1ml裂解液中加入20μl 2M DTT)或β-巯基乙醇至终浓度为1% (如1ml裂解液中加入10μl β-巯基乙醇),含DTT或β-巯基乙醇的裂解液可在室温放置1个月。
      通过本试剂盒抽提到的RNA已经去除绝大多数DNA,通常情况无需DNase处理。后续如进行某些对极少量DNA残留较敏感的实验,则需要在使用说明中步骤5离心后,在纯化柱中加入适量DNase I (如80μl含10U DNase I的酶溶液,推荐使用碧云天的DNase I,D7076),室温消化15分钟。消化结束后,不要离心,直接加入500μl洗涤液II,进入使用说明的步骤6进行操作。
      本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free,操作时应小心,避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话,以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。
      对于操作环境中RNA酶的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。
      使用冻存的细胞或组织抽提RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品中的RNA。对于组织样品,推荐使用碧云天生产的RNALater™动物组织RNA稳定保存液(R0118)进行保存以保证样品RNA的完整性。
      本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
      废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
      结合液I、II和洗涤液II中含有乙醇,使用后须旋紧瓶盖以防挥发,并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

RNAeasy? Plus动物RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • 供应商联系方式:
  • 联系人 碧云天
  • 公司名称 碧云天生物技术有限公司
  • 电话 400-1683301
  • 手机 800-8283301
  • 传真 
  • 邮箱 order@beyotime.com
  • 地址 上海市松江区新飞路1500弄30号
  • 公司简介:
  • 碧云天由美国哈佛大学的留学人员创办于2001年,为上海市高新技术企业,公司核心团队由来自美国哈佛大学、NIH、UCLA、香港大学、南京大学、中国科技大学、中国科学院等著名大学和科研机构的高水平科研人员及默克、诺华等顶尖医药企业的管理人员组成。十多年来,碧云天已经成为世界一流的生物、医学研究用试剂、试剂盒和消耗品的研发和生产企业,同时提供生命科学研究的技术服务和一站式实验仪器设备采购平台。目前已有近50000篇注明使用碧云天产品的研究论文发表在包括Nature、Cell等国际高水平学术期刊,日均逾33.37篇!碧云天将继续致力于科研用技术和产品的研发,用我们最顶尖的技术、最成熟的产品、最热情的服务,服务科研人员,造福生命健康
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