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RNAeasy?动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)

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基本信息:

  • 发布时间: 2019-10-21
  • 产品名称: RNAeasy?动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • 产品英文名称: RNAeasy?动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • CAS号: 
  • 产品包装:  50次
  • 产品价格: 616.00无
  • 有效期: 一年
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  • 保存条件: 
  • 纯度规格: 
  • 产品类别: RNA相关 RNA提取

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RNAeasy?动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)

产品描述:

产品编号
产品名称
产品包装
产品价格
R0028
RNAeasy™动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)
50次
616.00元

      碧云天的离心柱式RNAeasy™小RNA抽提试剂盒(RNAeasy™ Small RNA Isolation Kit with Spin Column),也称离心柱式miRNA抽提试剂盒(miRNA Isolation Kit with Spin Column),是一种基于离心柱法从动物组织或培养的动物细胞中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提miRNA等小于200个核苷酸(nucleotide, nt)的小RNA(small RNA)的试剂盒。
      本试剂盒抽提得到的小RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern等常规实验,也可以用于基因芯片分析
(microarray)、高通量测序(high throughput sequencing)等对小RNA质量要求较高的情况。
      碧云天的三款离心柱式及Trizol法RNA抽提试剂盒的主要特点和差异如下:

产品编号
R0024/ R0026/ R0027
R0028
R0032
R0011/R0016
产品名称
RNAeasy™动物RNA
抽提试剂盒
RNAeasy™动物小RNA
抽提试剂盒
RNAeasy™ Plus动物RNA
抽提试剂盒
Beyozol
Trizol
推荐指数
★★★★★
★★★★★
★★★
★★
抽提方式
离心柱式
离心柱式
离心柱式
原始方式
抽提产物
RNA(>200nt)
小RNA(<200nt)
总RNA
(含<200nt的小RNA)
总RNA
(含<200nt的小RNA)
操作时间
最短(15-20分钟)
稍较长(20-25分钟)
较长(25-30分钟)
最长(45-60分钟)
操作步骤
4步骤()
6步骤()
6步骤()
很多步骤
使用便捷性
★★★★★
★★★★
★★★★
★★
推荐细胞量/得率
50-100万/5-20μg
50万/1-2μg
50-100万/5-20μg
50-100万/5-20μg
推荐组织量/得率
5-20mg/10-40μg()
5mg/1-1.5μg()
3-5mg/3-10μg()
50mg/100-500μg(很多)
RNA纯度
有毒有害试剂
人体与环境安全
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(Thermo)
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用途
非小RNA相关各种用途
小RNA相关各种用途
不同长度RNA各种用途
不同长度RNA各种用途

      动物组织或细胞中的RNA按照长度可以分为长链RNA(long RNA)和小RNA(small RNA),长链RNA通常大于200nt(也常被称为总RNA),而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA(ribosomal RNA)、5S rRNA、tRNA(transfer RNA)、microRNA(miRNA)、siRNA(small interfering RNA)、piRNA(Piwi-associated small RNA)、tsRNA(tRNA-derived small RNA)、srRNA(small rDNA-derived RNA)等。
      本试剂盒抽提小RNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解,释放出总RNA,然后在两次高速离心过程中,通过离心柱将不同大小的RNA分离。第一次过柱时,200nt以上的RNA特异性结合到纯化柱上,而200nt以下的小RNA穿柱而过被收集到液体收集管中;第二次过柱时,特定的结合体系使小RNA结合到另一个纯化柱上。然后通过2次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质,最后用洗脱液将高纯度的小RNA洗脱下来。


图1. 离心柱式小RNA抽提流程示意图

      本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的柱纯化介质进行小RNA分离纯化,不仅能有效避免传统的Trizol法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂,也能有效避免如国外知名的Q品牌等公司使用类似于Trizol的裂解液裂解样品、接着使用氯仿分层、后续再进行柱纯化等涉及的有毒有害有机试剂。
      本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒采用柱纯化,无需繁琐的RNA沉淀步骤,抽提操作过程仅20-25分钟。相比于传统的Trizol抽提法,本试剂盒能够有效去除大分子RNA,操作流程显著简化,缩短了抽提时间,降低了RNA降解的风险。和国外同类柱纯化产品相比,所需操作步骤和操作时间基本一致。
      本试剂盒抽提获得的小分子量RNA得率高、纯度好。100万培养动物细胞约能抽提得到1-2μg小RNA,5mg小鼠肝脏组织约能抽提得到1-1.5μg小RNA。A260/A280通常为2.0-2.2。本试剂盒与国际知名T品牌同类产品的抽提效果对比图参见图2。

      图2.本试剂盒与T品牌同类产品的小RNA抽提效果对比。样品为冻存的100万个HeLa细胞、5mg小鼠肝组织和5mg小鼠肾组织。洗脱液用量均为30μl。均取6μl洗脱的样品经变性处理后,在含7M尿素的15% TBE-PAGE中电泳约90分钟后在NA-Red溶液中染色后拍照。碧云天试剂盒抽提产物的A260/A280依次为2.01、2.07和2.06;T品牌试剂盒抽提产物的A260/A280依次为1.93、1.79和1.29。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,本图仅供参考。

      本试剂盒用于抽提18-200 nt小RNA,主要包括5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、microRNA (miRNA),以及short
interfering RNA (siRNA)、piRNA、tsRNA等,能够有效去除基因组DNA和200nt以上的RNA,如28S rRNA、18S rRNA、mRNA等。
      本试剂盒适用于新鲜或冻存的动物组织或细胞样品小RNA的抽提。样品的用量对抽提效果影响较大,样品用量过多会导致在第一次过柱时不能最大程度去除200nt以上的RNA,通常建议培养细胞的用量不超过100万,动物组织的用量不超过5mg。
      本试剂盒可用于50个样品的小RNA抽提。
包装清单:

产品编号
产品名称
包装
R0028-1
裂解液
16ml
R0028-2
结合液I
16ml
R0028-3
结合液II
38ml
R0028-4
洗涤液
63ml
R0028-5
洗脱液
5ml
R0028-6
RNA纯化柱及废液收集管
100套
R0028-7
RNA洗脱管
50个
说明书
1份

保存条件:
      室温保存,一年有效。
注意事项:
      对于富含RNase的样品(如动物组织),建议使用前在裂解液中添加二硫苏糖醇(Dithiothreitol, DTT)至终浓度为40mM (例如1ml裂解液中加入20μl 2M DTT)或β-巯基乙醇至终浓度为1% (如1ml裂解液中加入10μl β-巯基乙醇),含DTT或β-巯基乙醇的裂解液可在室温放置1个月。
      本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free,操作时应小心,避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话,以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。
      对于操作环境中RNA酶的去除,推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。
      使用冻存的细胞或组织抽提小RNA的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品中的RNA。对于组织样品,推荐使用碧云天生产的RNALater™动物组织RNA稳定保存液(R0118)进行保存以保证样品RNA的完整性。
      本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
      废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
      结合液I、结合液II和洗涤液中含有乙醇,使用后须旋紧瓶盖以防挥发,并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

RNAeasy?动物小RNA抽提试剂盒(离心柱式)
  • 供应商联系方式:
  • 联系人 碧云天
  • 公司名称 碧云天生物技术有限公司
  • 电话 400-1683301
  • 手机 800-8283301
  • 传真 
  • 邮箱 order@beyotime.com
  • 地址 上海市松江区新飞路1500弄30号
  • 公司简介:
  • 碧云天由美国哈佛大学的留学人员创办于2001年,为上海市高新技术企业,公司核心团队由来自美国哈佛大学、NIH、UCLA、香港大学、南京大学、中国科技大学、中国科学院等著名大学和科研机构的高水平科研人员及默克、诺华等顶尖医药企业的管理人员组成。十多年来,碧云天已经成为世界一流的生物、医学研究用试剂、试剂盒和消耗品的研发和生产企业,同时提供生命科学研究的技术服务和一站式实验仪器设备采购平台。目前已有近50000篇注明使用碧云天产品的研究论文发表在包括Nature、Cell等国际高水平学术期刊,日均逾33.37篇!碧云天将继续致力于科研用技术和产品的研发,用我们最顶尖的技术、最成熟的产品、最热情的服务,服务科研人员,造福生命健康
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