Semagacestat (Gamma -secretase抑制剂)

化学名

(2S)-2-hydroxy-3-methyl-N-[(2S)-1-[[(5S)-3-methyl-4-oxo-2,5-dihydro-1H-3-benzazepin-5-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]butanamide

简称

Semagacestat

别名

LY-450139, LY450139, Semagacestat (LY450139), UNII-3YN0602W4W

中文名

司马西特

化学式

C₁₉H₂₇N₃O₄

分子量

361.44

CAS号

425386-60-3

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO72mg/ml; Ethanol41mg/ml

溶液配制

5mg加入1.38ml DMSO，或者每3.61mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF4166-10mM用DMSO配制。

产品描述

Semagacestat (LY450139)是一种γ-分泌酶抑制剂，作用于Aβ42、Aβ40和Aβ38，IC50分别为10.9nM、12.1nM和12.0nM，也抑制Notch信号通路，人神经胶质瘤细胞中IC50为14.1nM。Phase 3。

信号通路

Proteases; Stem Cells & Wnt; Neuronal Signaling

靶点

γ secretase(Aβ42)

γ secretase(Aβ38)

γ secretase(Aβ40)

Notch

－

IC50

10.9nM

12.0nM

12.1nM

14.1nM

－

体外研究

Semagacestat降低稳定过量表达人类野生型的H4人类胶质瘤细胞分泌Aβ42、Aβ40和Aβ38到培养基中，IC50分别为10.9nM、12.1nM和12.0nM，不会影响细胞活性。Semagacestat也提高细胞溶解物中的β-CTF，ECmax为16.0nM，且最高浓度时这种上升可被快速降低。Semagacestat抑制Notch信号，IC50为14.1nM。Semagacestat降低表达内源性鼠APP的鼠CTX分泌Aβ40到培养基中，这种作用存在浓度依赖性，但是鼠CTX中形成的Aβ42比Aβ40低12倍，与野生型鼠的神经元数据一致。

体内研究

Semagacestat按1mg/kg剂量口服给药5.5月大的APP转基因Tg2576小鼠，明显改善记忆障碍，8天亚慢性剂量给药后，则消失。LY450139按10mg/kg和30mg/kg剂量分别作用于降低Aβ42和Aβ40，Aβ42和Aβ40则分别降低22-23%和36-41%，且按0.3-10mg/kg剂量处理提高β-CTF,这种作用存在剂量依赖性，不会抑制其他脑部γ-分泌底物，如Notch、N-cadherin或EphA4，但是在Y-maze损害试验中野生型鼠的正常认知，以及3个月大的Tg2576小鼠不能修复认知缺陷。

临床实验

N/A

特征

Semagacestat是有记载的的γ-分泌酶抑制剂，已经进入临床试验。

酶活性检测实验

方法

用不同浓度Semagacestat处理稳定过量表达人类野生型APP695H4的人类神经胶质瘤细胞24小时。使用分离的ELISA试剂盒测定培养基中Aβ42、Aβ40和Aβ38水平。Notch (NotchΔE)组成型活性形式的表达载体，编码人类Notch1编码区(NM_017617)的1-60碱基和5193-6657碱基，用于构建具有从鼠到人修饰序列的pcDNA3.1载体。使用Cignal RBP-Jk受体实验试剂盒测定Notch信号活性。RBP-Jk 蛋白[CSL/CBF1/Su(H)/Lag1]是转录因子，使用Notch细胞内域，通过γ-分泌酶激活。使用Lipofectamine 2000H4细胞使H4细胞暂时转染人类NotchΔE表达载体和RBP-Jk-敏感的荧光素，然后用不同浓度Semagacestat处理16小时。基于荧光素酶活性，在细胞溶解物中，使用双荧光素酶报告基因系统测定Notch信号。

细胞实验

细胞系

小鼠皮层神经元和小脑颗粒细胞

浓度

溶于DMSO，终浓度为10μM左右

处理时间

24小时

方法

用Semagacestat处理细胞24小时。为了测定细胞活力和0.5mg/ml MTT温育60分钟，通过测定降低MTT的能力而测量细胞活力百分数。为了测定sAPP种类，溶解细胞，然后通过Western Blotting进行分析。

动物实验

动物模型

表达人类Swedish(K670N/M671L)突变的APP695雌性Tg2576鼠

配制

溶于0.5%甲基纤维素

剂量

~30mg/kg

给药方式

口服处理，每天一次

产品编号

产品名称

包装

SF4166-10mM

Semagacestat (Gamma -secretase抑制剂)

10mM×0.2ml

SF4166-5mg

Semagacestat (Gamma -secretase抑制剂)

5mg

SF4166-25mg

Semagacestat (Gamma -secretase抑制剂)

25mg

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说明书

1份