SirReal2 (SIRT2抑制剂)

化学名

2-(4,6-dimethylpyrimidin-2-yl)sulfanyl-N-[5-(naphthalen-1-ylmethyl)-1,3-thiazol-2-yl]acetamide

简称

SirReal2

别名

SirReal 2; 3TE; BAS 09687905; AC1LM3MJ; ZINC818861; STL019057; ZINC00818861; ST50111553

中文名

－

化学式

C₂₂H₂₀N₄OS₂

分子量

420.55

CAS号

709002-46-0

纯度

98.7%

溶剂/溶解度

Water <1mg/ml; DMSO 84mg/ml warmed; Ethanol <1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.19ml DMSO，或者每4.21mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0290-10mM用DMSO配制。

产品描述

SirReal2是一种有效的选择性Sirt2抑制剂，IC50为140nM。

信号通路

Epigenetics; DNA Damage

靶点

SIRT2

－

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IC50

140nM

－

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－

体外研究

在HeLa细胞中，SirReal2通过Sirt2-特异性氨基酸网络选择性抑制Sirt2，并诱导微管蛋白高度乙酰化和BubR1的显著消耗。

体内研究

在体内，SirReal2抑制Sirt2活性，而不影响其他I类抗衰老酶Sirt1和Sirt3的活性。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

初始筛选通过高通量荧光试验使用合成的基底ZMAL (Z-Lys(Acetyl)-AMC)进行。人Sirt1133-747，人Sirt225-389，人Sirt3101-399或Sirt3118-395与试验缓冲液(50mM Tris/HCl，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2 pH 8.0)，β-NAD+ (终试验浓度500μM)，底物ZMAL (12.6mM储备液在DMSO中稀释到终试验浓度10.5μM)，以及DMSO中不同浓度的各抑制剂混合，DMSO作为对照组(终DMSO浓度5-20%(v/v))。混合物在37℃下，以150r.p.m搅拌培育4小时。加入包含NCA和胰蛋白酶(50mM Tris/HCl，100mM NaCl，6.7%(v/v)DMSO，胰蛋白酶5.5U/μl，8mM NCA pH8.0，60μl)的溶液停止脱乙酰化，然后培育混合物使脱乙酰化产物胰蛋白酶化以释放荧光(20min，37℃，150r.p.m.)。随后荧光强度在酶标仪(λex 390nM, λem 460nM)上测量。混合物中抑制的量与DMSO对照组进行确定。IC50值通过Graphpad Prism软件使用非线性回归拟合剂量响应曲线来确定。SirReal1和SirReal2与非标记的乙酰-赖氨酸多肽底物(基于α-微管蛋白与两个另外的色氨酸(残基36-44，H-PSDK(Acetyl)TIGGWW-NH2，10μM)) 进行Sirt1-3抑制测试。SirReal2与非标记乙酰-赖氨酸多肽底物(Sirt5：Benzoyl-GVLK(Succinyl)EYGV-NH2，10μM；Sirt6：Ac-EALPKK(Myristoyl)TGG-NH2，10μM)进行Sirt5-6抑制测试。底物进行培育(10min，~0.5μM Sirt1/2/3/5/6，500μM β-NAD+，5-20%(v/v)DMSO，50mM Tris/HCl，137mM NaCl，2.7mM KCl，1mM MgCl2 pH8.0)，通过加入三氟乙酸(TFA，10%(v/v)，终浓度1%(v/v))停止。终止反应混合物的成分通过HPLC(Agilent 1100，Phenomenex反相柱Kinetex RP18 2.7μM，50×3mm)使用线性梯度的乙腈(20-60%(v/v)乙腈，0.1%(v/v)TFA，0.6ml/min)进行分离。乙酰化的和脱乙酰化的底物通过280nM下的吸光度定量。Sirt4-依赖性脱乙酰化反应与乙酰化Nnt397-多肽(H-NITKLLK(Acetyl)AISPDK-NH2，250μM，GL BioChem，在50mM Tris/HCl中，150mM NaCl pH7.5)进行。在0和45分钟之间取样，反应通过以1:1与0.5%(v/v)TFA混合停止。随后将样品用0.1%(v/v)甲酸稀释到5μM的多肽浓度，并自连接到LTQ质谱仪的EASY-nLCII上分析。多肽在reprosil C18反相柱上通过线性梯度的乙腈(0-100%(v/v)，0.1%(v/v)TFA，300nl/min)分离。乙酰化和脱乙酰化多肽的峰面积使用Skyline55提取。DMSO溶液用作阴性对照，而生理抑制剂NCA溶液作为阳性对照。

细胞实验

细胞系

N/A

浓度

N/A

处理时间

N/A

方法

N/A

动物实验

动物模型

N/A

配制

N/A

剂量

N/A

给药方式

N/A

产品编号

产品名称

包装

SC0290-10mM

SirReal2 (SIRT2抑制剂)

10mM×0.2ml

SC0290-5mg

SirReal2 (SIRT2抑制剂)

5mg

SC0290-25mg

SirReal2 (SIRT2抑制剂)

25mg

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说明书

1份