Sunitinib (PDGFR抑制剂)

化学名

N-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(Z)-(5-fluoro-2-oxo-1H-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-1H-pyrrole-3-carboxamide

简称

Sunitinib

别名

SU 011248, SU 11248, SU-011248, SU-11248, SU011248, SU11248, sunitinib malate, Sutent, 舒尼替尼

中文名

苏尼替尼

化学式

C₂₂H₂₇FN₄O₂

分子量

398.47

CAS号

557795-19-4

纯度

99.0%

溶剂/溶解度

Water <1mg/ml; DMSO 25mg/ml warmed; Ethanol <1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.25ml DMSO，或者每3.98mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC0240-10mM用DMSO配制。

产品描述

Sunitinib是一种多靶点RTK抑制剂，以VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ为靶点，IC50为80nM和2nM，对c-Kit也有抑制作用。

信号通路

Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis

靶点

PDGFRβ

VEGFR2

FGFR1

EGFR

－

IC50

2nM

80nM

2.9μM

>20μM

－

体外研究

Sunitinib能够有效抑制Kit和FLT-3。Sunitinib是VEGFR2(Flk1)和PDGFRβ有效的ATP竞争性抑制剂，Ki分别为9nM和8nM，作用于VEGFR2和PDGFR比作用于FGFR-1、EGFR、Cdk2、Met、IGFR-1、Abl和src选择性高10倍多。在血清饥饿的表达VEGFR2或PDGFRβ的NIH-3T3细胞中，Sunitinib抑制VEGF依赖性VEGFR2磷酸化和PDGF依赖性PDGFRβ磷酸化，IC50分别为10nM和10nM。对于过表达PDGFRβ或PDGFRα的NIH-3T3细胞，Sunitinib抑制VEGF对其诱导的增殖，IC50分别为39nM和69nM。Sunitinib抑制野生型FLT3、FLT3-ITD和FLT3-Asp835磷酸化，IC50分别为250nM、50nM和30nM。Sunitinib抑制MV4;11和OC1-AML5细胞的增殖，IC50分别为8nM和14nM，并以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡。

体内研究

与实质性，选择性抑制VEGFR2或PDGFR在体内磷酸化与信号传导一致，Sunitinib(20-80mg/kg/day)对各种肿瘤异种移植模型，包括HT-29、A431、Colo205、H-460、SF763T、C6、A375或MDA-MB-435表现出广泛有效的剂量依赖性抗肿瘤活性。Sunitinib以80mg/kg/day的剂量给药21天，导致8只小鼠中6只完全的肿瘤消退，并且在治疗结束后，110天的观察期内肿瘤不会再生。第二轮使用Sunitinib治疗依然能够有效抗肿瘤，但是不能完全恢复到轮治疗的情况。Sunitinib治疗导致肿瘤MVD显著下降，在SF763T神经胶质瘤中减少~40%。SU11248治疗导致表达荧光素酶的PC-3M异种移植物额外的肿瘤生长被完全抑制，尽管肿瘤大小没有减少。在FLT3-ITD骨髓移植模型中，Sunitinib治疗(20mg/kg/day)显著抑制皮下MV4;11(FLT3-ITD)异种移植物的生长，并延长生存。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

Sunitinib作用于VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ的IC50值使用包含PKT完整胞浆区的谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白测定。生物化学的酪氨酸激酶试验，用来测定VEGFR2(Flk-1)和PDGFRβ反式磷酸化活性，在多肽底物poly-Glu,Tyr(4:1)预涂层(在PBS中20μg/well，4℃下培养过夜)的96微孔板中进行。过量蛋白结合位点通过加入1-5%(w/v) BSA的PBS溶液阻断。纯化的GST融合蛋白在感染杆状病毒的昆虫细胞中产生。将GST-VEGFR2和GST-PDGFRβ加入微孔板的2倍浓度激酶稀释缓冲液(由100mM HEPES、50mM NaCl、40μM NaVO4和0.02%(w/v) BSA组成)中。对GST-VEGFR2或GST-PDGFRβ的最终酶浓度为50ng/ml。随后将25μl稀释的Sunitinib加入每个反应孔中以产生一系列适用于每个酶的抑制剂浓度。激酶反应通过加入不同浓度的ATP MnCl2溶液起始，使ATP浓度跨越酶的Km值，终MnCl2浓度为10mM。板在室温下培养5-15分钟，然后加入EDTA停止反应。将板用TBST洗涤3次。在TBST(包含0.5%(w/v) BSA、0.025%(w/v)脱脂奶粉和100μM NaVO4)中以1:10,000稀释的兔子多克隆抗磷酸酪氨酸抗血清加入孔中，并在37℃下培养1小时。然后将板用TBST洗涤3次，接着加入山羊抗兔抗血清结合的辣根过氧化物酶(在TBST中以1:10,000稀释)。板在37℃下培养1小时，然后用TBST清洗3次。加入2,2'-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]作为底物后，测定每孔中的磷酸酪氨酸酶数量。

细胞实验

细胞系

RS4;11、MV4;11和OC1-AML5

浓度

溶解于DMSO，终浓度为~10μM

处理时间

24和48小时

方法

加入Sunitinib和FL(50ng/ml，仅FLT3-WT细胞)之前，细胞在包含0.1% FBS的培养基中饥饿过夜。培养48小时后，使用Alamar Blue法或台盼蓝细胞活性法测定增殖。加入Sunitinib 24小时后，通过蛋白免疫印迹法检测多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的裂解或caspase-3水平，以测量细胞凋亡。

动物实验

动物模型

皮下植入HT-29、A431、Colo205、H-460、SF763T、C6、A375或MDA-MB-435的雌性nu/nu小鼠和负荷表达荧光素酶的PC-3M肿瘤的雄性nu/nu小鼠

配制

以羧甲基纤维素悬浮液或柠檬酸盐缓冲溶液(pH3.5)形成

剂量

~80mg/kg

给药方式

口服，每天一次

产品编号

产品名称

包装

SC0240-10mM

Sunitinib (PDGFR抑制剂)

10mM×0.2ml

SC0240-5mg

Sunitinib (PDGFR抑制剂)

5mg

SC0240-25mg

Sunitinib (PDGFR抑制剂)

25mg

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说明书

1份