Tandutinib (FLT3抑制剂)

化学名

4-[6-methoxy-7-(3-piperidin-1-ylpropoxy)quinazolin-4-yl]-N-(4-propan-2-yloxyphenyl)piperazine-1-carboxamide

简称

Tandutinib

别名

MLN518, MLN-518, MLN 518, CT 53518, CT-53518, CT53518

中文名

坦度替尼

化学式

C₃₁H₄₂N₆O₄

分子量

562.7

CAS号

387867-13-2

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO25mg/ml warming; Ethanol6mg/ml

溶液配制

5mg加入0.89ml DMSO，或者每5.63mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC1058-10mM用DMSO配制。

产品描述

Tandutinib (MLN518)是一种有效的FLT3拮抗剂，IC50为0.22μM，同时也抑制PDGFR和c-Kit，对FLT3作用效果比CSF-1R强15到20倍，比FGFR、EGFR和KDR等强100倍以上。Phase 2。

信号通路

Angiogenesis; Protein Tyrosine Kinase

靶点

c-Kit

PDGFRβ

FLT3

CSF-1R

Src

IC50

0.17μM

0.20μM

0.22μM

3.43μM

30μM

体外研究

与Staurosporin不同，Tandutinib有效抑制FLT3、βPDGF和c-Kit自磷酸化，IC50为0.17-0.22μM，而作用于EGFR、FGFR、KDR、InsR、Src、Abl、PKC、PKA和MAPKs几乎没有效果。Tandutinib抑制不依赖IL-3的细胞生长，也抑制FLT3-ITD自磷酸化，IC50为10-100nM。Tandutinib也抑制含FLT3-ITD突变的人白血病Ba/F3细胞增殖，IC50为10-30nM，抑制FLT3-ITD-阳性的Molm-13和Molm-14细胞时，IC50为10nM。Tandutinib作用于FLT3-ITD阳性Molm-14细胞而不是FLT3-ITD阴性THP-1细胞，因为特定抑制FLT3，处理24和96小时，分别引起显著凋亡达51%和78%。与作用于患Aml的ITD阴性患者相比，Tandutinib优先抑制患Aml的FLT3 ITD阳性患者体内爆发式集落生长，而不影响正常人祖细胞形成集落。加入低纳摩尔Tandutinib显著降低Cytarabine或Daunorubicin的量，而Cytarabine或Daunorubicin是获得抗增殖效果所必需的，说明Tandutinib和Cytarabine/Daunorubicin联用大大增强协同作用。

体内研究

Tandutinib按60mg/kg剂量口服处理，每天两次，显著提高携带表达W51 FLT3-ITD突变型Ba/F3细胞的小鼠寿命，而作用于小鼠骨髓移植模型，显著降低死亡率。Tandutinib按180mg/kg剂量每天处理两次，对正常造血功能产生轻微毒性，Tandutinib作用于小鼠，可以有效治疗FLT3 ITD-阳性的白血病。

临床实验

N/A

特征

N/A

酶活性检测实验

方法

PDGFR家族激酶的自磷酸化实验是基于细胞的酶联免疫检测实验，使用表达野生型βPDGFR，嵌合蛋白βPDGFR/c-Kit和βPDGFR/Flt3的CHO细胞，含有βPDGFR的跨膜结构域及c-Kit和Flt-3的胞浆域。细胞在96孔板上汇合，培养在标准组织培养基中，然后血清饥饿处理16小时。使用浓度不断增加的Tandutinib处理静态细胞30分钟，然后加入8nM PDGF-BB处理10分钟。细胞溶解在100mM Tris，pH 7.5、 750mM NaCl、0.5% Triton X-100、10mM焦磷酸钠、50mM NaF、10μg/ml抑肽酶、10μg/ml亮肽素、1mM苯甲基磺酰氟、1mM钒酸钠，在15000g转速下离心5分钟，清除裂解液。澄清的裂解液转移到第二个孔板上，孔中事先用500ng/孔1B5B11 anti-β PDGFR mAb包被，然后在室温下温育2小时。使用结合buffer(0.3%明胶、25mM HEPES，pH 7.5、100mM NaCl、0.01% Tween-20)冲洗三次后，然后加入250ng/ml兔单克隆抗磷酸抗体，实验板在37℃下温育60分钟。随后,每孔使用结合buffer冲洗三次，再与1μg/ml辣根过氧化物酶标记的抗兔抗体在37℃下温育60分钟。孔中冲洗后，加入2,2'-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)，在650nM处检测底物形成率。

细胞实验

细胞系

Ba/F3、Molm-13、Molm-14、HL60、Aml193、KG-1、KG-1a、THP-1和RS4;11

浓度

溶于DMSO，终浓度为~30μM

处理时间

~7天

方法

使用浓度不断增高的Tandutinib(0.004-30μM)处理细胞。细胞在组织培养基中生长3-7天，使用台酚蓝染色排除法测定细胞，然后计数。收集细胞，冲洗，然后悬浮在100μl含10mM HEPES (pH 7.4)，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂的结合buffer中，每天一次。在细胞悬液中加入膜联蛋白V-FITC(100ng)和碘化丙啶(250ng)，然后在室温下温育15分钟。在FACSort流式细胞仪上染色后，立刻进行流式细胞仪技术，然后在488nM处测定激发光。在515nM和585nM处分别测定膜联蛋白V-FITC和DNA碘化丙啶染色的荧光值。

动物实验

动物模型

注射表达W51 FLT3-ITD突变型的Ba/F3细胞的雌性无胸腺裸鼠

配制

悬浮在溶于水溶液的0.5%甲基纤维素(MC)上

剂量

40-120mg/kg/day

给药方式

口服饲喂

产品编号

产品名称

包装

SC1058-10mM

Tandutinib (FLT3抑制剂)

10mM×0.2ml

SC1058-5mg

Tandutinib (FLT3抑制剂)

5mg

SC1058-25mg

Tandutinib (FLT3抑制剂)

25mg

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说明书

1份