Trametinib (MEK抑制剂)

化学名

N-[3-[3-cyclopropyl-5-(2-fluoro-4-iodoanilino)-6,8-dimethyl-2,4,7-trioxopyrido[4,3-d]pyrimidin-1-yl]phenyl]acetamide

简称

Trametinib

别名

GSK1120212, GSK 1120212, GSK-1120212, JTP 74057, JTP-74057, JTP74057

中文名

曲美替尼

化学式

C₂₆H₂₃FIN₅O₄

分子量

615.39

CAS号

871700-17-3

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO22mg/m warmingl; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入0.81ml DMSO，或者每6.15mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SD5973-10mM用DMSO配制。

产品描述

Trametinib (GSK1120212)是一种高特异性的，有效的MEK1/2抑制剂，无细胞试验中IC50为0.92nM/1.8nM，对c-Raf、B-Raf、ERK1/2没有抑制活性。

信号通路

MAPK

靶点

MEK1

MEK2

－

－

－

IC50

0.92nM

1.8nM

－

－

－

体外研究

GSK1120212抑制MBP的磷酸化，对于不同亚型的Raf和MEK而言，IC50在0.92nM-3.4nM。GSK1120212对c-Raf、B-Raf、ERK1和ERK2的激酶活性没有抑制作用。另外，GSK1120212对于其它98种激酶没有很强的抑制作用。GSK1120212对于人结肠癌细胞系有很强的抑制作用，其中HT-29和COLO205细胞组成型表达有活性的B-Raf突变，这两种细胞对GSK1120212最为敏感，IC50分别是0.48nM和0.52nM。含有k-Raf突变的细胞系对GSK1120212的敏感性介于如下范围，IC50是2.2-174nM。相反地，COLO320 DM细胞中B-Raf 和K-Ras均为野生型，因而即便在10μM都对GSK1120212有抗性。用GSK1120212处理24小时可以诱导所有敏感细胞的细胞周期停滞在G1期。与此一致，GSK1120212处理使得大部分人结肠癌细胞系中p15INK4b和/或p27KIP1的表达量上升。GSK1120212能诱导HT-29和COLO205细胞的凋亡，COLO205细胞更为敏感。GSK1120212抑制外周血单核细胞产生肿瘤坏死因子-α和白介素-6。

体内研究

按0.3mg/kg或1mg/kg的剂量口服GSK1120212(一天一次共14天)能有效抑制HT-29肿瘤，1mg/kg的剂量可完全抑制肿瘤生长。在癌症组织中，一次口服1mg/kg GSK1120212能完全抑制ERK1/2的磷酸化，14天后能提高p15INK4b和p27KIP1的表达量。在COLO205肿瘤模型中，0.3mg/kg剂量的GSK1120212就足以抑制肿瘤生长，1mg/kg剂量的GSK1120212可以使2/3的老鼠的肿瘤消退至可检测水平之下。0.1mg/kg剂量的GSK1120212完全抑制佐剂性关节炎(AIA)和II型胶原诱导的关节炎(CIA) Lewis大鼠或DBA1/J小鼠。

临床实验

N/A

特征

药效大于PD0325901或AZD6244。

酶活性检测实验

方法

非磷酸化的髓鞘碱性蛋白(MBP)涂覆到ELISA板上，B-Raf/c-Raf的活性形式与非磷酸化MEK1/MEK2和ERERK2混合在10μM ATP和12.5mM MgCl₂，其MOPS缓冲液中含有不同浓度的GSK1120212。MBP的磷酸化是由抗磷酸化的MBP抗体进行检测。

细胞实验

细胞系

HT-29, HCT-15, HCT116, COLO205, LS-174T, SW480, SW620, T84, LoVo, COLO320

浓度

溶解在DMSO中至终浓度约10μM

处理时间

3天或4天

方法

指数生长的细胞预培养在96孔组织培养板中24小时后用GSK1120212孵育。细胞生长是通过体外毒理学测定试剂盒(基于磺酰罗丹明B)检测。对于细胞凋亡测定，漂浮和贴壁细胞被收集并用70%乙醇固定。用PBS洗涤后，将细重胞悬在100微克/毫升RNA酶和25微克/毫升的碘化丙啶(PI)中，至于37℃黑暗中30分钟。每一个单细胞的DNA含量是用流式细胞仪Cytomics FC500或番石榴EasyCyte来确定。

动物实验

动物模型

雌雄BALB/c-nu/nu小鼠皮下注射HT-29或COLO205细胞

配制

溶解于10%的Cremophor EL-10%PEG400

剂量

1mg/kg/day

给药方式

口服

产品编号

产品名称

包装

SD5973-10mM

Trametinib (MEK抑制剂)

10mM×0.2ml

SD5973-5mg

Trametinib (MEK抑制剂)

5mg

SD5973-25mg

Trametinib (MEK抑制剂)

25mg

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说明书

1份