TSU-68 (VEGFR抑制剂)

化学名

3-[2,4-dimethyl-5-[(Z)-(2-oxo-1H-indol-3-ylidene)methyl]-1H-pyrrol-3-yl]propanoic acid

简称

TSU-68

别名

SU-6668, Orantinib, SU 6668, SU6668

中文名

N/A

化学式

C₁₈H₁₈N₂O₃

分子量

310.35

CAS号

252916-29-3

纯度

98%

溶剂/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO62mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.61ml DMSO，或者每3.1mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF5301-10mM用DMSO配制。

产品描述

TSU-68 (SU6668, Orantinib)有效作用于PDGFR自磷酸化，无细胞试验中Ki为8nM，也强效抑制Flk-1和FGFR1反式磷酸化，对IGF-1R、Met、Src、Lck、Zap70、Abl和CDK2几乎没有抑制活性；对EGFR没有抑制作用。Phase 3。

信号通路

Protein Tyrosine Kinase; Angiogenesis

靶点

PDGFRβ

FGFR1

Flk1

－

－

IC50

8nM(Ki)

1.2μM(Ki)

2.1μM(Ki)

－

－

体外研究

TSU-68是ATP竞争性抑制剂，作用于Flk-1/KDR磷酸转移、FGFR1磷酸转移和PDGFRβ激酶时，Ki分别为2.1μM、1.2μM和8nM。0.03-10μM　TSU-68作用于VEGF刺激的HUVECs，抑制KDR酪氨酸磷酸化。最低浓度为0.03-0.1μM的TSU-68作用于过量表达PDGFRβ的NIH-3T3 细胞，也抑制PDGF刺激的PDGFRβ酪氨酸磷酸化。10μM和更高浓度TSU-68抑制FGF酸性-诱导的FGFR1底物2的磷酸化。然而，高达100μM TSU-68作用于过量表达EGFR的NIH-3T3细胞，不抑制EGF刺激的EGFR酪氨酸磷酸化。TSU-68抑制VEGF驱动的和FGF驱动的HUVECs分裂，平均IC50分别为0.34和9.6μM。TSU-68作用于人类骨髓性白血病MO7E细胞，抑制肝细胞因子(SCF)受体c-kit的酪氨酸自磷酸化，IC50为0.1-1μM，也抑制ERK1/2磷酸化。TSU-68也抑制SCF刺激的MO7E细胞增殖，IC50为0.29μM，且诱导凋亡。

体内研究

TSU-68按75-200mg/kg剂量作用于携带多种移植瘤的无胸腺小鼠，包括A375、Colo205、H460、Calu-6、C6、SF763T和SKOV3TP5细胞，抑制细胞生长。TSU-68按75mg/kg剂量作用于C6神经胶细胞移植瘤，也阻断肿瘤血管生成。TSU-68按200mg/kg剂量作用于HT29人类结肠癌肿瘤模型，降低肿瘤边缘的平均血管通透性和肿瘤中心的平均血浆容积分数。TSU-68促进肿瘤周围形成异常基质形成。TSU-68按200mg/kg剂量作用于兔VX2肝脏肿瘤模型，增加注射化学治疗的效果。

临床实验

N/A

特征

TSU-68是有效的受体酪氨酸激酶Flk-1/KDR、PDGFRβ和FGFR1抑制剂。

酶活性检测实验

方法

测定Flk-1和FGFR1磷酸转移活性的酪氨酸激酶实验在预包被肽底物聚Glu,Tyr(4:1)的96孔板上进行，聚Glu,Tyr(4:1)溶于PBS，每孔加20μg，在4℃下温育过夜。溶于PBS的1-5% (w/v) BSA阻断过量的蛋白质结合位点。纯化的GST-FGFR1(激酶域)或GST-Flk-1(胞浆区) 融合蛋白加到孔中，激酶稀释buffer浓度为2×，含100mM HEPES，50mM NaCl，40μM NaVO₄和0.02% (w/v) BSA。作用于GST-Flk-1和GST-FGFR1的酶终浓度为50ng/ml。SU6668溶于DMSO，所需的终浓度为100×，且按1:25稀释在H₂O中。25μl稀释的SU6668随后加到每个反应孔中。加入溶于MnCl₂溶液的不同浓度ATP开始激酶反应，MnCl₂终浓度为10mM。板在室温下温育5-15分钟，然后加入EDTA终止反应。然后用 TBST冲洗板三次。兔多克隆抗磷酸酪氨酸的抗血清加到孔中，用含0.5% (w/v) BSA，0.025% (w/v)脱脂奶粉和100μM NaVO₄的TBST按1：1×10⁴稀释，然后在37℃下温育１小时。用TBST冲洗板三次，随后加入HRP标记山羊抗兔抗血清二抗。板在37℃下温育1小时，然后用TBST冲洗三次。加入2,22,2'-azino-di-[3-ethylbenzthiazoline sulfonate]底物后定量检测磷酸化酪氨酸。

细胞实验

细胞系

表达PDGFRβ或EGFR的HUVECs和NIH-3T3细胞

浓度

0.03-10μM，溶于DMSO，作为10mM储存溶液

处理时间

1小时

方法

细胞按每35mm孔接种3×10⁵个细胞在含10% (v/v) FBS的DMEM培养基上，细胞生长融合，然后在含0.1%血清的DMEM培养基上处理2小时，然后进行药物处理。HUVECs按每10cm板接种2×10⁶个细胞在内皮细胞生长培养基上，细胞生长融合，然后在含0.5% FBS的内皮细胞疾病培养基上进行24小时，然后进行药物处理。所有细胞和SU6668温育1小时，然后用100ng/ml配体刺激10分钟。进行Western blotting。

动物实验

动物模型

携带A375、Colo205、H460、Calu-6、C6、SF763T和SKOV3TP5移植瘤的雌性BALB/c，nu/nu鼠

配制

溶于DMSO

剂量

75-200mg/kg

给药方式

腹腔注射或口服饲喂，每天一次。

产品编号

产品名称

包装

SF5301-10mM

TSU-68 (VEGFR抑制剂)

10mM×0.2ml

SF5301-5mg

TSU-68 (VEGFR抑制剂)

5mg

SF5301-25mg

TSU-68 (VEGFR抑制剂)

25mg

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说明书

1份