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昆虫基因组DNA提取试剂盒

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北京 更新日期:2024-12-08

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
昆虫基因组DNA提取试剂盒
产品类别:
基因提取 DNA纯化

昆虫基因组DNA提取试剂盒

Insect DNA Kit

试剂盒内容及保存:

试剂盒组成

RTG2408

50次)

贮存方式

缓冲液IL

22 ml

常温

缓冲液IB

15 ml

常温

DNA Wash Buffer (浓缩液)

13 ml

常温

缓冲液WB

30 ml

常温

洗脱缓冲液EB

15 ml

常温

蛋白酶K

1 ml

-20℃

RNaseA

220 μl

-20℃

吸附柱CG

50个

常温

收集管(2 ml)

50个

常温

说明书

1份

 

 

储存条件和效期:

室温保存,12个月内有效。缓冲液IL与缓冲液 IB可能有沉淀产生,37℃水浴溶解后即可。RNase A和蛋白酶K常温运输,-20℃保存。

产品简介:

该试剂盒采用独特的裂解液能够有效除去多糖多酚等,能够从昆虫、软体动物、节肢动物、蛔虫等样品中提取DNA,保存在在醇类的样品也适用于本试剂盒的提取。一次操作可以处理小于50mg组织,样品经裂解液消化,氯仿分离除去大部分的多糖多酚,再经分离柱进一步纯化,便可得到高纯度的DNA。所得的DNA可以用于PCR,Southern杂交,酶切消化等实验。

准备工作:

1. 准备65℃水浴;无水乙醇;氯仿;制冰机;1.5ml离心管;2ml离心管

2. 按照标签所示在DNA Wash Buffer中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。

3. 每次使用前请检查缓冲液IL,缓冲液IB是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。

标准操作步骤:

如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1. 液氮充分研磨样品。

2. 收集研磨成粉末的50mg样品,置于1.5ml离心管中。

3. 加入350μl65℃预热的缓冲液 IL,并加入20μl 蛋白酶K剧烈地漩涡振荡,确保所有的组织团都分散均匀。

4.65℃水浴20-30min。水浴期间颠倒样品数次。

5. 加入350μl氯仿,充分混匀,12,000 rpm (~13,400×g )  离心5分钟。

6. 小心地把上清液吸至另一新的1.5ml离心管中。注意确保不要打散沉淀团或把组织碎片也一起转移。 

7. 加入4μl RNase A,涡旋混匀。室温放置2min。

8. 加入二分之一上清体积的 缓冲液 IB与等体积的无水乙醇,充分混匀。如:向300μl上清中加入150μl 缓冲液 IB与300μl无水乙醇。  

9. 把上述混匀的液体转移到吸附柱上。10,000×g离心1 min以结合DNA,弃去滤出液体。纯化柱容量为750μl,如果混合液大于750μl,请分两次过柱。 

10. 将吸附柱重新套回收集管中,加入500μl 缓冲液WB至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;

11. 将吸附柱重新套回收集管中,加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;

注意:DNA Wash Buffer使用前须按要求用无水乙醇稀释。如果放入冰箱中,使用前须恢复到室温。 

12.再加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,8,000×g离心1min,弃去流出液;

13. 将吸附柱重新套回2ml收集管中,转速(>13000×g)离心空结合柱1min以干燥柱子的基质;这一步对下面的洗脱步骤至关重要。 

14. 将柱子置于1.5ml灭菌离心管,加入50-150μl65℃预热的洗脱缓冲液EB至柱子的膜中央。室温静置5min; 

15. 室温下,离心(>13000)1min,以洗脱DNA。保留含DNA的流出液。将DNA储于-20℃。

 

DNA浓度及纯度检测:

基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。

昆虫基因组DNA提取试剂盒_DNA提取_DNA纯化_

公司简介

中科瑞泰(北京)生物科技有限公司成立于2006年,是一家致力于产品研发、试剂销售、技术服务为一体的生物技术企业。公司秉承“以人为本,诚信至上”的服务理念,依靠客户的大力支持和我们的不懈努力获得了快速的发展。 公司组织结构清晰,内部管理科学,拥有一支配备合理的年轻化队伍,充分保障了公司的研发能力和在竞争日益激烈的市场中占据一席之地。 我们深知一颗幼苗的萌发和成长不仅需要我们坚强的信念和持久的毅力,更离不开广大用户的呵护和培养,是广大客户给了我们广阔的成长和发展空间,使这颗幼苗得以抽枝展叶,继而繁茂生长。在这里,请广大客户接受我们最为诚挚的谢意!我们也承诺将为你们提供最为优质的产品和最为优良的

成立日期 (19年)
注册资本 10.000000万人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易,工厂,试剂,定制,服务
主营行业 细胞培养,蛋白组学,分子生物学,免疫安全,生物芯片

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