PFU DNA聚合酶

pfu DNA Polymerase

高保真平末端DNA聚合酶

● 贮存

   -20℃保存一年。

● 产品简介

pfu DNA Polymerase是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶，该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外，还具有很强的3’-5’外切酶活性，增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比，pfu聚合酶热稳定性更好，更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A，为平滑末端，要通过平滑末端克隆法进行克隆。

● 产品组成（RTH3102-02）

pfu DNA Polymerase（2.5U/μl）            40μl

10×pfu PCR buffer（含Mg^2＋）             1ml

● 活性定义

1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

● 酶贮存缓冲液

50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

● 适用范围

高保真的DNA片段的扩增、DNA片段的平滑化。

● 使用说明：

1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

注1：如果需要改变Mg²⁺浓度，根据下表调节

注2：配制反应液时，请最后加入pfu，因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性，有可能降解引物。

2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。

3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。

4. PCR仪上执行以下程序：

*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定的反应条件（温度、时间等）。