间充质干细胞－脐带

培养条件

培养基：DMEM/F12+10%FBS 

气相：空气，95%；二氧化碳，5% 

温度：37℃

细胞描述

细胞名称：人脐带间充质干细胞

细胞数量：1×106个 

细胞活力： >90% 

代数：p1-p3代

细胞检测： 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 

细胞冻存：液氮冻存（DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO） 

细胞运输：干冰运输（冻存细胞）

细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗

细胞传代方法

显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。

在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中

用PBS或者生理盐水洗一遍

加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟

然后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟

离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。

细胞复苏方法

细胞在收到后，如果不是立刻进行实验，转移到液氮中保存。如果立刻实验，细胞在37℃水浴迅速解冻，在3分钟内完成。

超净台中准备15ml离心管一支，装入10ml培养基，然后用移液器将细胞转移到离心管中，轻轻吹打均匀。

1200转/分，离心5分钟后收集细胞

弃去上清，再加入5ml DMEM/F12+10%FBS完全培养基，转入T-25培养瓶中培养，进行后续的实验。