小鼠外周血树突状细胞

培养条件

培养基：树突状细胞完全培养基 

气相：空气，95%；二氧化碳，5% 

温度：37℃

细胞描述

名称：C57小鼠外周血树突状细胞

状态：成熟或者未成熟均可以提供

数目：大于106 /管

活力：＞90%

冻存：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO

运输：干冰运输（1管）或者活细胞一瓶

用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗

细胞传代方法

显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。

在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中

用PBS或者生理盐水洗一遍

加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟

然后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟

离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3-1:5的比例进行细胞传代培养。

注：C57小鼠外周血树突状细胞不宜进行多次传代培养，使用新鲜的p0代细胞进行实验。

细胞冻存方法

本品使用DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO 冻存液冷冻。

细胞复苏方法

取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min，

酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基

将离心管离心（1000rpm，5 min）

弃去上清，再加入5ml 树突状细胞完全培养基，转入培养瓶中培养。