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BY4741感受态细胞

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上海 更新日期:2024-12-25

上海联迈生物工程有限公司

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产品详情:

中文名称:
BY4741感受态细胞
产品类别:
基因 感受态细胞

产品规格 (CAT#: LM1060)

BY4741 Competent Cell:                                      100μl/支             保存: -80℃(3个月)

 

pYES2 (control vector, 10 ng/μl)                               10μl              保存:-80℃(12个月)

Carrier DNA (10 μg/μl)                                             100μl              保存:-20℃(12个月)

PEG/LiAC:                                                                    5ml              保存:    4℃(12个月)

 

BY4741感受态细胞基因型

 

MATa his3Δ1 leu2 met15Δ ura3-52

 

 

BY4741感受态细胞产品说明

BY4741菌株来源于酿酒酵母原始菌株——S288C,是实验室的常用菌株,为配子MATa型,广泛应用于钠,钾离子平衡;细胞抗盐;各种金属离子的吸收;重金属毒性;各种糖类,碳源对真核生物细胞生长的影响;过氧化物,超氧化物的吸收与运输的研究中。BY4741酿酒酵母为组氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸 、尿嘧啶缺陷型菌株,可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入BY4741细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA,可用SD-URA板板进行筛选。唯地生物生产的BY4741感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存三个月,pYES2质粒检测转化效率>10cfu/μg DNA。

 

 

 

 

BY4741感受态细胞操作方法

1. 取100 μl冰上融化的BY4741感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒1-3 μg,Carrier DNA (96℃水浴3 min,快速冰浴

3 min,重复一次) 10 μl,PEG/LiAc 500 μl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。

2. 将感受态移到42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。

3. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 μl 重悬,离心 30s弃上清。

4. ddH2O 50 μl重悬,涂板,29℃培养48-96 h。

 

 

 

 

注意事项

 

1. 感受态细胞在冰上融化。

2. 若使用pYES2质粒表达蛋白,需在培养基中加入2%的半乳糖(筛选培养基中不用加半乳糖;当需要目的蛋白表达时,需加入半乳糖代替葡萄糖作为碳源),以诱导目的基因的表达。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。

5. 酵母为真核生物,不易长期保存,随感受态在-80℃保存时间的延长,转化效率会不断下降,建议保存时间不超过90天。

6. BY4741酵母菌株对高温敏感,最适生长温度为27-30℃;高于31℃,生长速度和转化效率呈指数下降。

7. 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢,培养基中缺陷成分越多,生长越慢,以转化涂板为例:涂YPDA平板29℃,48 h培养可见直径1 mm克隆;涂SD单缺平板29℃,48-60 h培养可见直径1 mm克隆,涂SD双缺平板29℃,60-80 h培养可见直径1 mm克隆,涂SD三缺或四缺平板平板29℃,80-90h培养可见直径1 mm克隆。

BY4741_感受态细胞_基因_

公司简介

上海联迈生物工程有限公司(LMAI Bio)是一家经营生物、仪器、试剂、耗材等科研产品的高新技术生命科学公司,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力, 已成为国内生命科学领域产品的一家供应商,代理许多国际先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊 断等多个研究及应用领域。 公司的服务和业务网络遍及全国,在同行获得一致好评。 特别是生物试剂和细胞产品更是种类齐全、价格实惠,美国原装进口原代细胞,专业培养基,常用传统培养基,细胞培养用的相关试剂,氨基酸,抗生素,维他命类产品品种齐全,试剂耗材种类繁多。 公司的规模和产品种类日益扩大和更新,我们一直秉承着代理优质品牌的产品,服务好每一位顾客,将

成立日期 (8年)
注册资本 100.000000万人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易,工厂,试剂,定制,服务
主营行业 生化试剂,细胞培养,蛋白组学,分子生物学,细胞生物学

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