基本信息 产品图片 产品描述 供应商联系方式 同类产品
网站主页 > 化工产品目录 >  生物 > 技术服务 > 免疫生化实验 > NF-KB P65活性检测

NF-KB P65活性检测

基本信息 产品图片 产品描述 供应商联系方式 同类产品

基本信息:

  • 发布时间: 2019-03-14
  • 产品名称: NF-KB P65活性检测
  • 产品英文名称: 
  • CAS号: 
  • 产品包装: 1次
  • 产品价格: 
  • 有效期: 
  • 品牌: 
  • 产地: 
  • 保存条件: 
  • 纯度规格: 
  • 产品类别: 技术服务 免疫生化实验

产品图片:

NF-KB P65活性检测

产品描述:

NF-KB p65活性检测

 
一、核转录因子NF-kappaB介绍

1、核转录因子NF-kappaB(NF-kB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。
 
2、NF-kappaB(NF-kB)最初被鉴定为在B细胞中和免疫球蛋白k轻链的增强子结合。但随后在非B-细胞的细胞质中被发现,形成NF-kB和IkB的复合物。最初在DNA结合蛋白复合物中分离的NF-kB是由p65(RelA)和p50构成的异源双聚体。其他分离的单体包括p49(也可称为p52),p75(c-Rel),p68(RelB)。p65,p68,p75单体起反式激活作用。p50,p49(p52)单体具有DNA结合活力,但只具有微量的反式激活作用。据报道p49和NF-kB的单体p65形成具有转录活力的异源双体,类似于p50/ p65异源双体。p49/ p65和p50/ p65异源双体在细胞质中受一种叫IkBa/MAD-3的抑制剂调节。


 
二、NF-kappaB p65检测原理

1、IkB和p65单体结合,阻制了细胞核中的定位和DNA的结合。在体外高浓度的p65能形成同源双聚体,能和DNA微弱地结合。Poly(dI:dC)能抑制这一反应(14)。p49和p50也能形成同源双聚体,但在细胞中的浓度很低。通常,在作NF-kB的凝胶迁移实验时,在20ul的反应体积中,有溶于10 mM HEPES的0.28pmoles 的NF-kB9寡核苷酸(pH7.9), 50mMKCl, 0.2mMEDTA, 2.5mM DTT, 10%甘油, 0.05%NP-40。当用纯化的蛋白时,250-300ng足以形成凝胶迁移复合物,而需用10ug的HeLa细胞核抽提物。凝胶迁移复合物在室温中保温30分钟,在50mMTris(pH8.3)和38mM甘氨酸的7%聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离凝胶迁移复合物。

2、含考马斯兰和二甲苯蓝色素的加样溶液只能加入到阴性对照反应中,因这两种色素会加剧NF-kB复合物的解离。当用HeLa细胞核抽提物作为结合蛋白来源时,可形成两种序列特异的凝胶迁移复合物,即p50/p50同源双聚体和p50/ p65异源双聚体。在表达p49,p50,p65的细胞中,可检测到4个序列特异的凝胶迁移复合物(p49/ p49,p50/ p50,p50/ p65,p49/ p65),如果存在高浓度的p65,可检测到微量的p65/p65。
 
3、下列试剂可加强NF-kB在体外的结合:mM的GTP,ATP,精胺,亚精胺,钡或钙离子,ng的Co+3(NH3)6(12)。

4、提取组织或细胞核蛋白,利用不同形式的NF-Κb p65抗体捕获细胞核蛋白并加以区分,通过酶标仪450nm处测定核蛋白标准品与NF-Κb p65吸光度值,进行定量比较,从而明确目的蛋白的活化度。
 
 
NF-KB P65_活性检测_生化试验_
  • 供应商联系方式:
  • 联系人 嘉美臻元
  • 公司名称 北京嘉美臻元生物技术有限公司
  • 电话 400-000-7401
  • 手机 400-000-7401
  • 传真 
  • 邮箱 lab-manager@jiamay.com
  • 地址  北京市昌平区中东路5号院4号楼1809
  • 公司简介:
  • 北京嘉美臻元生物技术有限公司(嘉美实验)是一家专注于生命科学领域的高科技企业,公司创立于2005年,由在国内科研试剂、实验技术、质量管理领域有着十几年从业经验的专业、专家团队组建而成;2009年在北京重组,先后成立了北京嘉美诺斯生物科技有限公司(主要开展生物相关产品进、出口业务),北京嘉美纽诺生物科技有限公司(主要为大型药厂、诊断试剂公司提供服务)。为方便实验服务项目开展,成立了北京嘉美臻元生物技术有限公司,以“嘉美实验”品牌提供实验外包服务。近五年来,公司已为全国各类科研用户提供了近5000个大大小小的专项实验外包或整体课题外包项目服务,实验项目涵盖了生命科学、医学的各研究领域。经过多年努力,公司已成为
NF-KB P65活性检测生产厂家及价格:
  • 产品名称NF-KB P65活性检测
  • 价格
  • 供应商名称北京嘉美臻元生物技术有限公司
  • 发布时间2019-03-14