TAQMAN MICRORNA定量PCR试剂盒

探针法作为microRNA定量研究的金标准，具有高特异性、高灵敏度的优势。Biorab的TaqMan miRNA定量PCR试剂盒，采用特异性的正向miRNA引物和接头引物进行PCR扩增，检测荧光基团采用FAM标记的TaqMan探针。使用该试剂盒可以高特异性、高灵敏度的检测低至100个细胞的miRNA分子，并可区分相似度极高的miRNAs。Biorab的TaqMan miRNA定量PCR试剂盒多达一万余种，试剂盒编号为MTTxxxxx，每一个mircoRNA分子对应一个检测试剂盒（包含特异性的TaqMan探针、正向引物、反向引物、定量试剂）。

TaqMan microRNA定量PCR试剂盒原理图：


产品组成：

储存：请置于-20℃，可保存2年；避免反复冻融。

检测效果和应用实例：

1．高灵敏度（最高可到0.1fM级水平)


2．高特异性，有效区分单碱基差异


3．应用实例


内参基因可选择使用：
1．TaqMan RNU6B miRNA 定量 PCR 试剂盒（货号：MTT01501）适用于人、鼠等哺乳动物组织、细胞样品；
2．TaqMan hsa-miR16 miRNA 定量 PCR 试剂盒（货号：MTT01511）适用于来源于人、鼠全血样品。

操作方法：

1．配制反应体系根据机型选择步骤A或B
步骤A：需要添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：ABI 7000/7300/7500/7900 等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

注意：cDNA 模板来自于 TaqMan miRNA 反转录产物。
步骤B：无需添加 ROX 染料进行反应孔间信号矫正的Real-Time PCR 仪，包括：LightCycler（Roche)； MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad)；Line-Gene(杭州博日)等。按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：

注意：cDNA 模板来自于 TaqMan miRNA 反转录产物。

2．进行 Real-Time PCR 反应通常采用两步法，程序如下：

收集信号采用FAM 染料通道，反应结束后确认 Real-Time PCR的cDNA 样品和 NTC 阴性对照的扩增曲线。