溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒

      溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒(Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit)是一种对溶酶体中酸性β-半乳糖苷酶(Acid β-Galactosidase)进行染色检测的试剂盒，常用作细胞衰老检测时的对照。在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织中溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情况。本试剂盒可以用于培养细胞的检测，也可以用于组织切片的检测。
      绝大多数正常细胞都可以检测到较高水平的溶酶体β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作细胞衰老β-半乳糖苷酶染色时的参考染色。细胞衰老特异的β-半乳糖苷酶仅在衰老时表达，而溶酶体β-半乳糖苷酶几乎在任何情况下都表达。
      碧云天生产的溶酶体β-半乳糖苷酶染色试剂盒，以X-Gal为底物，在溶酶体酸性β-半乳糖苷酶的催化下会生成深蓝色产物。从而在光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。本产品染色后的HeLa细胞请参考图1。

图1. HeLa细胞使用本产品染色后的示例图片。

      本试剂盒仅染色溶酶体酸性β-半乳糖苷酶，不会染色衰老特异性的β-半乳糖苷酶，也不会染色外源转染表达的用于报告基因的β-半乳糖苷酶(大肠杆菌的β-半乳糖苷酶)。
      主要特点：本试剂盒经过多方面的优化，是同类产品中首创的能兼容普通的细胞培养用多孔板、移液管等聚苯乙烯类材质耗材或容器的试剂盒。本试剂盒可以有效避免由于和多孔板、移液管等的不兼容导致的染色偏弱、染色效果不稳定等情况。通常同类试剂盒要求使用可高温高压灭菌的聚丙烯(polypropylene)材质的耗材、容器或玻璃容器进行溶液的配制，而不能使用普通的多孔板、移液管等聚苯乙烯(polystyrene)类材质的容器或耗材，否则可能会出现絮状沉淀，影响实验观察。即使严格按照要求操作，也会在染色时间比较长的情况下，容易出现絮状物沉淀(参考图2)。本试剂盒经过多方面的优化，对耗材或容器的材质无特殊要求，可以兼容普通的多孔板和移液管等常用耗材和容器。而且配制的工作液不会产生沉淀或不溶物，使用更加便捷。

      图2. 本试剂盒优化前后的对比图。优化前，X-Gal溶液直接接触聚苯乙烯类材质的材料如移液管、多孔板等会产生明显的腐蚀(A图)，使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后，在显微镜下观察有异常的絮状不溶物(C图)；优化后，X-Gal溶液直接接触聚苯乙烯类材质的材料观察不到有任何异常情况(B图)，使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后，在显微镜下观察也没有任何异常情况(D图)。

      如果使用6孔板检测，足够测定100个样品；使用24孔板测定，足够测定400个样品；使用96孔板测定，足够测定1000个样品。对于组织切片或组织块，可以检测的样品数量视样品的大小而定。对于普通切片的滴染足够检测100个样品。
包装清单：

保存条件：
      -20℃保存，一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。
注意事项：
      β-半乳糖苷酶染色固定液对人体有毒、有腐蚀性，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
      X-Gal溶液在-20ºC或4ºC保存会冻结，室温或37ºC水浴2-5分钟并适当摇动即可完全融解。
      β-半乳糖苷酶染色液B在刚刚溶解后会观察到有沉淀，属正常现象，充分混匀或Vortex后，沉淀会全部溶解。作为常规，试剂使用前必须确保沉淀全部溶解，并且混匀。
      使用96孔板等多孔板进行检测时，如果孵育过夜容易产生所谓的“边缘效应”(edge effect)，即多孔板四周的孔由于和外界最直接接触，易受外界环境影响，其中最明显的是四周细胞培养孔的蒸发效应。边缘效应会导致细胞生长不均匀、细胞分布不均一、培养液体积不一致、培养液中相关成分的浓度、pH值不一致。建议采取以下方法避免96孔板等多孔板的边缘效应：避免孵育过长时间，以避免蒸发等带来的边缘效应；弃用边缘孔并在弃用的边缘孔中加入等量的水、PBS或其他适当溶液；在多孔板非孔的凹陷处加入适量的水或其他适当溶液；将整块板放在湿盒中；使用防挥发盖；在实验设计时，实验样品进行随机分配，不要将某一组样品固定放在某个位置而引入可能的系统性误差。
      需自备PBS或HBSS(Hanks Balanced Salt Solution)。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。