RIP-Kit

技术原理

RIP（RNA Inmumnoprecipitation，RNA免疫共沉淀）是基于免疫沉淀原理的RNA-蛋白互作研究技术，在真实生理环境下捕获、富集与特定蛋白结合的RNA。RNA结合蛋白（RNA-binding proteins，RBPs）是一类能特异性结合RNA分子的蛋白质，通过识别和结合RNA分子的特定序列，RBPs在维持RNA稳定性、参与RNA修饰加工、调节RNA运输和翻译等过程中起重要的作用。

RIP实验使用针对目标RNA结合蛋白的特异性抗体，对细胞裂解液进行免疫沉淀，共沉淀获取的RNA即为该蛋白的潜在结合靶标。产物后续可通过qRT-PCR验证特定转录本的结合情况，或构建文库进行高通量测序（即RIP-Seq）。

技术应用

（1）结合高通量测序（RIP-Seq）：在全转录组水平鉴定特定RBP的结合靶标，揭示不同条件下的靶标偏好性变化。<br>

（2）结合qPCR进行靶向验证：定量比较候选RNA靶标的富集倍数，验证生物信息学预测结果或筛选关键调控靶点。<br>

（3）RIP广泛应用于转录后调控机制（如剪接调控和翻译调控）、非编码RNA功能、疾病中RNA-蛋白互作、病毒RNA-宿主互作等多种研究领域。

技术特点

（1）与CLIP相比，RIP无需交联和超声，流程更简便，获取RBP结合的转录本信息，适合初步筛查。<br>

（2）与RNA-pulldown相比，RIP通过抗体富集生理环境中的蛋自获取RNA，常用于发现目标蛋白结合的RNA。<br>

（3）RIP-Seq与qPCR联合：先通过RIP-Seq发现潜在的互作RNA，再通过RIP-qPCR对关键靶标进行快速验证，形成完整的发现-验证流程。

产品优势

（1）无忧RNA讲解：含有高效RNase抑制剂和蛋白酶抑制剂，无假阴性风险。<br>

（2）背景信号弱：优化的封闭及洗涤组合，非异性结合核酸比例<30%。<br>

（3）试剂齐全：富集产物浓度低，含小片段，回收难度大，本产品含有RNA回收试剂。<br>

（4）实验时间短：全流程<3h。