小鼠胰腺腺泡细胞

小鼠胰腺腺泡细胞

采用组织块贴壁法从C57BL/6小鼠的胰腺腺泡细胞来源组织中分离目标细胞，经胶原酶 II 和 Dispase 联合消化后，通过密度梯度离心纯化目标细胞组分，接种于特异性包被（如胶原 I/明胶/多聚赖氨酸）的培养表面，使用组织特异性培养基（含 10% FBS 及针对性生长因子）培养；通过免疫荧光染色检测细胞类型特异性标志物表达，结合倒置显微镜形态学观察和分子生物学方法（RT-qPCR/Western blot）验证细胞身份与功能特性。

产品名称：小鼠胰腺腺泡细胞

英文名称： Mouse Pancreatic Acinar Cells

组织来源： 胰腺组织

默认种属 ：昆明小鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的小鼠胰腺腺泡细胞采用胶原酶消化法制备而来。

质量检测  实验室分离的小鼠胰腺腺泡细胞经亚甲基蓝染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：  小鼠胰腺腺泡细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 短梭形、多角形

传代比例： 不传代

传代特性： 不增殖；不传代

消化液： 0.25%胰蛋白酶

小鼠胰腺腺泡细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

小鼠麻醉处死，体表酒精消毒，解剖取出胰腺，预冷无菌 PBS 充分冲洗，剔除脂肪、淋巴组织，注意避免挤压胰腺组织，防止腺泡细胞提前损伤释放酶原。

将胰腺剪碎成 1‑3mm 组织碎块，加入胶原酶 P 消化工作液，37℃水浴温和振荡消化 12‑18min，控制消化时间，消化过度会造成腺泡细胞破损死亡。

加入含血清的完全培养基终止消化，轻柔吹打分散组织，通过 100μm 细胞筛过滤，截留未消化组织块，收集下方细胞悬液。

细胞悬液离心 1000r/min 5min，弃上清，预冷 PBS 重悬沉淀洗涤 2 次，清除消化酶、游离酶原以及破碎细胞碎片。

利用静置沉降法纯化腺泡细胞，将细胞悬液静置数分钟，腺泡团块自然沉降，舍弃上层含有大量杂细胞的悬浮液，收集底部腺泡细胞沉淀。

胰腺腺泡细胞专用完全培养基重悬细胞沉淀，进行细胞计数，调整合适接种密度接种，放置于 37℃、5% CO₂培养箱培养，该细胞原代存活周期有限，不宜长时间培养。

接种 12‑24h 观察腺泡细胞团存活状态，半量更换培养基，不要完全吸走培养液防止细胞团流失；尽量在细胞状态良好的 2‑3 天内开展功能实验，避免细胞发生去分化。

1.操作过程需保持低温环境，室温下长时间暴露会导致细胞活力显著下降。

2.培养器皿无需特殊包被，成纤维细胞具有较强的自主贴壁和铺展能力，常规培养皿即可。

3.成纤维细胞体外增殖能力强，传代比例1:3至1:5，细胞融合达80-90%时需及时传代防止过度融合。

4.培养基中需添加20ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持细胞增殖活性。

5.培养期间注意观察是否有成纤维细胞过度生长压制其他细胞类型的情况，必要时使用选择性培养基。