产品名称 | 小鼠牙乳头细胞 | 组织来源 | 牙乳头组织 |
英文名称 | Mouse Dental Papilla Cells | 种属 | 昆明小鼠 |
规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | CS-X3080 |
方法简介 实验室分离的小鼠牙乳头细胞采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来。
质量检测 实验室分离的小鼠牙乳头细胞经DMP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 小鼠牙乳头细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠牙乳头细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
前置准备
实验动物：C57BL/6小鼠，取目标组织
试剂：0.25%胰蛋白酶、II型胶原酶、DNase I、DMEM培养基、胎牛血清(FBS)、PBS缓冲液、相应专用培养基组分
分离纯化步骤
取实验动物目标组织，用预冷PBS冲洗去除血液和杂质
剪碎组织后采用胶原酶消化法(37度、1-2小时)分散细胞
过滤后300g离心8-10分钟收集细胞
根据细胞类型采用适当方法进一步纯化(密度梯度离心/免疫磁珠分选/差速贴壁)
原代培养要点
将纯化后的细胞接种于适当包被的培养皿中
使用含10%FBS的DMEM/F12完全培养基，37度、5% CO2培养
每2-3天换液一次，根据细胞生长特性调整培养条件
常见问题优化
细胞得率低：根据组织特性优化消化时间和酶浓度
细胞纯度不高：采用多种纯化方法联合使用提高纯度
细胞表型维持：控制传代次数，必要时采用特殊培养基或包被基质
大鼠磷酸化细胞信号转导分子SMAD-7(P-SMAD7)elisa试剂盒 | P3U1浆细胞瘤 |
大鼠磷酸化细胞信号转导分子SMAD-2(P-SMAD2)elisa试剂盒 | 猪主动脉瓣膜间质细胞 |
大鼠P选择素(P-Selectin)elisa试剂盒 | 兔牙周膜成纤维细胞 |
大鼠鞘脂激活蛋白原(PSAP)elisa试剂盒 | 大鼠肾皮质上皮细胞 |
大鼠补体4B(C4B)elisa试剂盒 | 大鼠冠状动脉内皮细胞 |
大鼠补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(C1QTNF3)elisa试剂盒 | 大鼠脐带间充质干细胞 |
猪谷氨酸转运蛋白（SLC7A11）elisa试剂盒 | 人原代肾动脉平滑肌细胞 |
OVCAR-8人卵巢癌腺癌细胞专用培养基 | CTPS2基因过表达细胞株 |
Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞专用培养基 | CTNS基因过表达细胞株 |
人原代回肠粘膜上皮细胞专用培养基 | SV2C基因过表达细胞株 |
DMS114细胞专用培养基 | ADAM8基因过表达细胞株 |
人睾丸支持细胞永生化细胞专用培养基 | CHRNB4基因过表达细胞株 |
小鼠牙乳头细胞大鼠原代冠状动脉内皮细胞专用培养基 | CRTC1基因过表达细胞株 |
E0771/LUC细胞专用培养基 | DENND6A基因过表达细胞株 |
牙胚牙乳头组织取材：选取新生小鼠，安乐死后消毒颌面部，无菌解剖剥离下颌牙胚组织，体视显微镜下分离牙胚内部牙乳头间充质组织，剔除牙釉质、牙囊等其他组织，浸泡预冷 PBS。
组织漂洗剪碎处理：PBS 多次漂洗牙乳头组织，去除血液杂质，显微剪刀将牙乳头剪碎至 1 mm³ 细小组织块。
Ⅰ 型胶原酶消化解离：组织碎块加入 Ⅰ 型胶原酶消化液，37℃水浴消化 35‑45 min，定时颠倒混匀，使间充质细胞从基质解离。
终止消化筛网过滤：牙乳头细胞完全培养基终止酶反应，轻柔吹打悬液，70 μm 细胞筛过滤除去未消化组织残渣，收集单细胞悬液。
离心洗涤去除杂质碎片：1000 r/min 离心 7 min，弃上清废液，牙乳头完全培养基重悬细胞沉淀，二次离心洗涤清除消化酶残留。
细胞接种孵育贴壁：调节细胞悬液浓度接种普通培养瓶，37℃5% CO₂培养箱静置培养，接种后 24h 不移动瓶子，帮助牙乳头细胞贴壁伸展。
换液传代维持间充质特性：24h 后首次换液，去除悬浮死细胞；每 2‑3 天更换培养基；细胞汇合 80% 左右进行传代，严控传代次数，防止细胞发生分化衰老。
