小鼠微血管周细胞

小鼠微血管周细胞

基于原代组织酶消化法从C57BL/6小鼠微血管周细胞组织标本获取单细胞悬液，经密度梯度离心和免疫磁珠分选（MACS）双重纯化后，接种于 Matrigel 或胶原包被的培养表面，使用优化配方的专用培养基（含 10% FBS、特定细胞因子及添加剂）培养；通过多组学鉴定策略（免疫荧光/流式/转录组）确认细胞身份，并采用功能实验验证其生物学活性。

产品名称：小鼠微血管周细胞

英文名称： Mouse Microvascular Pericytes

组织来源： 微血管组织

默认种属 ：昆明小鼠

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的小鼠血管周细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法及不锈钢网筛过滤法结合密度梯度离心法制备而来。

质量检测  实验室分离的小鼠微血管周细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：  小鼠微血管周细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 成纤维细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传3代左右

消化液： 0.25%胰蛋白酶

小鼠微血管周细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞复苏：取出小鼠微血管周细胞冻存管，37℃水浴快速摇晃融化冻存液，冻存液融化完毕，酒精消毒管壁，移入超净工作台。

稀释冻存悬液：无菌将冻存管细胞悬液转移至装有预热微血管周细胞完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，稀释冻存保护剂。

离心收集细胞沉淀：离心管配平，1000r/min 离心 5min，离心结束，小心吸弃全部上清液体，留存管底细胞沉淀。

重悬打散细胞团：加入微血管周细胞完全培养基，轻柔吹打沉淀，打散细胞团聚物，制备单细胞悬液。

计数铺板接种：取样台盼蓝染色计数活细胞，按照实验密度接种培养板，十字晃动培养器皿，细胞均匀铺板。

恒温孵育贴壁：放置 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱静置孵育 24‑48h，减少挪动，利于周细胞贴壁伸展。

换液与共培养实验准备：镜检细胞形态，弃旧培养基更换新鲜培养基；细胞汇合后，用于血管相关共培养、损伤模型体外实验。

1.目标组织取材后迅速置于含青霉素-链霉素的Hanks液中运输，尽快分离平滑肌组织块。

2.培养器皿无需特殊包被，普通培养板即可支持平滑肌细胞贴壁，但用纤连蛋白包被可增强细胞贴附。

3.平滑肌细胞增殖速度中等，约3-4天换液一次，融合后呈峰谷状排列(蜂窝样)为典型特征。

4.培养基中补充10%FBS和0.1uM苯肾上腺素可维持平滑肌细胞收缩表型相关蛋白表达。

5.换液时弃去旧培养基后用PBS轻柔洗涤一次再加入新鲜培养基，可减少代谢废物积累。