小鼠外周血单核细胞
运用 Percoll 密度梯度离心法从C57BL/6小鼠外周血单核细胞外周血或组织中提取单个核细胞，经免疫磁珠分选（MACS）或流式分选（FACS）纯化目标免疫细胞亚群后，接种于纤连蛋白包被的培养表面，使用含细胞因子（IL-4、IL-13 或 GM-CSF）的 IMDM 培养基培养；通过流式细胞术多色分析 CD11c、MHC-II、CD80/86 等共刺激分子表达谱，结合 ELISA 检测细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-10）分泌水平鉴定免疫细胞功能表型。
产品名称：小鼠外周血单核细胞
英文名称： Mouse Peripheral Blood Monocytes
组织来源： 外周血
默认种属 ：昆明小鼠
产品规格：5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的小鼠外周血单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来。
质量检测 实验室分离的小鼠外周血单核细胞经CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基： 小鼠外周血单核细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 半贴壁半悬浮
细胞形态： 圆形、巨噬细胞样
传代比例： 不传代
传代特性： 不增殖；不传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
小鼠外周血单核细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞复苏：取出小鼠外周血单核细胞冻存管，37℃水浴快速融化冻存液，冻存液完全融化，75% 酒精消毒管壁，移入超净工作台。
稀释冻存细胞悬液：冻存管细胞悬液转移至预温 RPMI‑1640 完全培养基的 15mL 离心管，轻柔吹打混匀，稀释冻存保护试剂，减少悬浮细胞毒性损伤。
离心富集细胞沉淀：离心管配平，1000r/min 离心 5min，离心结束，小心吸弃上清，单核细胞沉淀松散，吸取上清不要触碰沉淀层。
重悬制备悬浮悬液：加入外周血单核细胞完全培养基，轻柔吹打沉淀，充分重悬细胞，得到均匀悬浮细胞悬液。
计数调整细胞密度：取样台盼蓝染色计数活细胞，按照实验要求调整细胞浓度，接种悬浮培养瓶。
培养箱悬浮孵育：放置 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱竖立孵育 24h，静置悬浮培养，不晃动培养瓶。
离心换液与诱导分化：离心法更换新鲜培养基，镜检细胞活力；可开展单核向巨噬细胞诱导分化、炎症刺激体外实验。
1.全程操作需在超净工作台内无菌条件下进行，任何污染风险均可能导致实验失败。
2.使用Matrigel基质胶稀释后包被培养器皿，4度过夜后37度预热使用。
3.该细胞类型体外培养寿命有限，原代细胞通常在5-10代内出现衰老现象。
4.添加5ng/ml转化生长因子-beta(TGF-beta)以调节细胞表型和功能维持。
5.实验选用C57BL/6或BALB/c小鼠，需注意小鼠品系差异对实验结果的影响。 细胞长至80-90%融合时进行传代，用0.25%胰蛋白酶消化后按1:3比例扩培。
大鼠Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)elisa试剂盒 | SNU-387肝癌 |
大鼠酪酪肽3-36(PYY3-36)elisa试剂盒 | 兔中耳上皮细胞 |
大鼠吡啶酚(pyridol)elisa试剂盒 | 兔滑膜成纤维细胞 |
大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(PYGM)elisa试剂盒 | 小鼠肝星状细胞 |
大鼠半乳糖脑苷脂抗体(GALC-Ab)elisa试剂盒 | 人肺鳞癌细胞HCC1588 (STR鉴定正确) |
大鼠半乳糖缺乏IgA1(Gd-IgA1)elisa试剂盒 | 兔肝实质细胞 |
猪核因子κB抑制物激酶（IKK）elisa试剂盒 | 绵羊原代前脂肪细胞 |
NCI-H82人小肺癌细胞专用培养基 | SLC7A14基因过表达细胞株 |
NIH/3T3小鼠胚胎细胞专用培养基 | PPARGC1A基因过表达细胞株 |
小鼠原代气管平滑肌细胞专用培养基 | BRINP1基因过表达细胞株 |
COLO320HSR细胞专用培养基 | 小鼠外周血单核细胞CYP4X1基因过表达细胞株 |
人原代扁桃体动脉平滑肌细胞专用培养基 | AVIL基因过表达细胞株 |
大鼠原代肝成纤维细胞专用培养基 | CRY1基因过表达细胞株 |
CT26细胞专用培养基 | F2RL2基因过表达细胞株 |
