兔肺大静脉内皮细胞

兔肺大静脉内皮细胞

从新西兰大白兔肺大静脉内皮细胞组织标本经胶原酶-弹性蛋白酶联合消化获取单细胞悬液，通过 Percoll 密度梯度离心纯化内皮细胞组分，接种于纤维连接蛋白预包被的培养皿中，使用内皮基础培养基 supplemented with 多种生长因子（VEGF、FGF-2、IGF-1 及 Ascorbic acid）维持培养；通过免疫荧光染色显示 CD31 膜染色阳性、vWF 胞质颗粒状表达，并结合乙酰化 LDL 荧光摄取实验和内皮管腔形成 assay 综合鉴定。

产品名称：兔肺大静脉内皮细胞

英文名称： Rabbit Pulmonary Great Vein Endothelial Cells

组织来源： 肺大静脉组织

默认种属 ：新西兰大白兔

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的兔肺大静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

质量检测  实验室分离的兔肺大静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）

培养基： 兔肺大静脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 内皮细胞样

传代比例： 1:2

传代特性： 可传1-3代

消化液： Accutase消化液或0.25%胰蛋白酶

兔肺大静脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

显微镜观察细胞汇合 80‑85%，吸弃旧培养基。

无菌 PBS 冲洗内皮贴壁层 2 次，吸净 PBS 液体。

内皮消化液覆盖细胞，37℃孵育 3‑5min，细胞变圆脱壁。

兔肺大静脉内皮完全培养基终止消化，轻柔吹打制悬液。

悬液移入离心管，1000r/min 离心 5min，弃上清废液。

肺大静脉内皮专用培养基重悬沉淀，分装接种。

37℃、5% CO₂培养箱培养，24h 观察贴壁，2‑3 天换液。

1.取材过程需严格无菌操作，组织块用PBS冲洗3次以上以去除血液残留，减少培养污染风险。

2.使用未包被的常规培养瓶即可，成纤维细胞贴壁能力强，一般在24小时内即可见细胞从组织块边缘迁出。

3.成纤维细胞体外增殖能力强，传代比例1:3至1:5，细胞融合达80-90%时需及时传代防止过度融合。

4.培养基中补充10%FBS和1%青霉素-链霉素，必要时可添加1ng/ml EGF促进细胞增殖。

5.换液时用PBS洗涤可减少培养基中积累的代谢废物，有利于维持细胞健康状态。