兔成骨细胞

兔成骨细胞

从新西兰大白兔长骨骨膜或骨组织经胶原酶 I/II 联合消化获取骨细胞，经差速贴壁纯化后接种于玻连蛋白包被的培养皿中，使用含 10% FBS 的 DMEM/F12 培养基培养；通过免疫荧光检测骨细胞标志物 E11/gp38、Piezo1、SOST（硬化蛋白）及 DMP1 表达，并采用共培养体系与破骨细胞前体细胞共培养验证成骨-破骨偶联信号传导功能。

产品名称：兔成骨细胞

英文名称： Rabbit Osteoblasts

组织来源： 颅骨组织

默认种属 ：新西兰大白兔

产品规格：5×10^5Cells/T25

方法简介  实验室分离的兔成骨细胞采用先用胰蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来。

质量检测  实验室分离的兔成骨细胞经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基： 兔成骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率： 每2-3天换液一次

生长特性： 贴壁

细胞形态： 梭形、多角形

传代比例： 1:2

传代特性： 可传3-5代左右；3代以内状态最佳

消化液： 0.25%胰蛋白酶

兔成骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

显微镜观察细胞汇合 80‑85%，吸弃旧成骨培养基。

PBS 缓冲液清洗贴壁细胞 2 次，吸净 PBS 液体。

成骨细胞消化液加入瓶内，37℃孵育 4‑6min，镜检细胞回缩。

兔成骨细胞完全培养基终止消化，吹打制备细胞悬液。

悬液移入离心管，1000r/min 离心 5min，舍弃上清。

成骨完全培养基重悬沉淀，分装接种传代。

37℃、5% CO₂培养箱培养，24h 查看贴壁，2‑3 天更换培养基。

1.目标组织取材后迅速置于含青霉素-链霉素的Hanks液中运输，尽快分离平滑肌组织块。

2.培养表面需用纤维连接蛋白(10ug/ml)或层粘连蛋白包被，室温孵育2小时。

3.平滑肌细胞增殖速度中等，约3-4天换液一次，融合后呈峰谷状排列(蜂窝样)为典型特征。

4.培养基中补充10%FBS和0.1uM苯肾上腺素可维持平滑肌细胞收缩表型相关蛋白表达。

5.实验选用新西兰白兔或日本大耳兔，需注意兔源细胞的种属特异性差异。 该细胞传代比例为1:2至1:3，每3-4天换液一次，避免过度融合影响细胞状态。